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申请/专利权人：中国科学院基础医学与肿瘤研究所(筹)
摘要：本发明公开了一种提高血红素DNAG四链体过氧化物酶活性的方法，属于生物材料领域。本发明通过使用DNAG‑四链体提高氯化血红素的过氧化物酶活性，并且通过DNA编码的微球进一步提高血红素DNAG‑四链体复合物的过氧化物酶活性，高效便捷。并且本发明方法中使用的DNA微球对反应体系中的离子浓度无特殊要求，因此能够与多种反应体系兼容，使用范围广泛。
主权项：1.一种提高氯化血红素DNAG-四链体复合物的过氧化物酶活性的方法，其特征在于，使用DNA微球提高所述氯化血红素DNAG-四链体复合物的过氧化物酶活性；DNAG-四链体的序列为SEQIDNO.1；DNA微球的制备方法，包括模板链环化物的制备、ssDNA聚合物的制备和DNA微球的自组装；模板链环化物的制备，包括如下步骤：将组成DNA微球的两条模板链分别与相应的环化引物混合；依次向体系中添加T4连接酶buffer，T4连接酶和DEPC水；混匀并在室温下震荡，然后灭活T4连接酶；之后向混合液中加入核酸外切酶孵育后灭活核酸外切酶；之后纯化即得浓缩的模板链环化物；所述两条模板链分别为SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示，SEQIDNO.2和SEQIDNO.3的5’均具有磷酸化修饰，SEQIDNO.2和SEQIDNO.3的模板链对应的环化引物分别为SEQIDNO.4和SEQIDNO.5；ssDNA聚合物的制备包括如下步骤：将上述模板链环化物分别与聚合酶缓冲液、扩增引物、聚合酶、焦磷酸酶和dNTP混合物和超纯水混合；之后将反应混合物在摇床上扩增；扩增完成后纯化即得浓缩的ssDNA聚合物；SEQIDNO.2和SEQIDNO.3的模板链环化物对应的扩增引物序列分别是TTAGGATAGATATACGGGT*T*C和TTTTAGAGGATCGTGTGGTT*T*T，*表示相应位点的磷酸化；DNA微球的自组装包括如下步骤：将上述两种ssDNA聚合物混合，然后加热；冷却后加入醋酸镁溶液；混匀后再次加热；冷却至室温即得DNA微球。
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权利要求：
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