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申请/专利权人：百蓁生物技术(武汉)有限公司
摘要：本发明提出了一种同时表征依那西普N糖肽和O糖肽的方法，包括以下步骤：S1，依那西普蛋白还原烷基化反应后利用胰蛋白酶、Glu‑C酶和O糖蛋白酶依次对依那西普糖蛋白进行酶解，然后对酶解后的肽段进行离心、脱盐和富集；S2，富集后的样品通过液相色谱‑质谱仪联用法采集数据，然后用GlycanFinder软件对采集的数据进行分析，鉴定N糖肽和O糖肽。本发明使用的胰蛋白酶，Glu‑C酶和O糖蛋白酶可以高特异性识别O糖修饰的ST，达到同时表征N糖肽和O糖肽的目的。采用本发明的方法成功鉴定到了3个N糖基化位点和22个O糖基化位点，糖肽富集效率高，实现了更高的灵敏度和更广泛的检测深度。
主权项：1.一种同时表征依那西普N糖肽和O糖肽的方法，其特征在于：包括以下步骤：S1，依那西普蛋白还原烷基化反应后利用Glu-C酶、O糖蛋白酶和酶胰蛋白酶依次对依那西普糖蛋白进行酶解，然后对酶解后的肽段进行离心、脱盐和富集；S2，富集后的样品通过液相色谱-质谱仪联用法采集数据，然后用GlycanFinder软件对采集的数据进行分析，鉴定N糖肽和O糖肽。
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