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申请/专利权人：苏州海苗生物科技有限公司
摘要：本发明公开了一种基于条件性信号发生的多重QPCR方法，QPCR扩增体系针对每个待测DNA片段包括一组扩增引物，以及一条人工模板以及Taqman探针，Taqman探针5'端标记有荧光报告基团和3'端标记有淬灭基团，所述人工模板包含待测DNA片段序列，Taqman探针特异性地与人工模板待测DNA片段序列的上游序列配对，仅当待测DNA片段单链与人工模板退火、延伸至Taqman探针5'端时，DNA聚合酶的外切酶活性水解Taqman探针荧光报告基因，产生荧光信号。本发明所述方法确保只有当扩增产物为正确的目的DNA片段时才可以进行探针的剪切，避免了非特异性荧光信号的产生以及对检测结果的干扰，使得检测结果更为准确，同时也提高了本发明方法的特异性，能够应用于样本数量庞大的多重QPCR。
主权项：1.一种基于条件性信号发生的多重QPCR方法，其特征在于：QPCR扩增体系针对每个待测DNA片段包括一组扩增引物，还包括一条人工模板以及Taqman探针，Taqman探针5'端标记有荧光报告基团和3'端标记有淬灭基团，所述人工模板包含待测DNA片段序列，Taqman探针特异性地与人工模板待测DNA片段序列的上游序列配对；QPCR程序包含:程序1：1在变性温度下，DNA样本变性得到DNA单链模板；2在退火温度下，扩增引物与DNA单链模板结合；3在延伸温度下，扩增引物延伸、扩增得到待测DNA片段；程序2：4在变性温度下，获得的待测DNA片段变性得到待测DNA片段单链；5在退火温度下，待测DNA片段单链与人工模板结合；6在延伸温度下，由待测DNA片段单链的3’端延伸扩增人工模板链，当延伸至探针的5’端时，DNA聚合酶切割水解探针，释放报告基因，检测信号。
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权利要求：
百度查询： 苏州海苗生物科技有限公司 一种基于条件性信号发生的多重QPCR方法
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