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申请/专利权人：华治医药(云南)有限公司

摘要：本发明提供一种快速检测菲牛蛭抗凝活性的方法，包括步骤1.取活体菲牛蛭，沥干水分，称重记录。步骤2.根据称重重量，加入菲牛蛭重量1.5倍的水。步骤3.用高速搅拌设备将加水的菲牛蛭活体进行匀浆处理。步骤4.用滴管吸取菲牛蛭浆1g，加入0.9％氯化钠溶液5ml，摇匀浸提30min，用滤纸过滤得滤液，进行滴定操作。步骤5.根据以上滴定检测的结果，将所得U值带入到推导的公式y＝10.287x‑13.211中，x值即为步骤4所得U值，计算后所得结果即为本批菲牛蛭原料制成冻干粉之后预期活性。本发明通过对活体样品加入一定比例的水进行匀浆，直接检测样品浆的活性，简化了流程，节约了时间。

主权项：1.一种快速检测菲牛蛭抗凝活性的方法，其特征在于,包括：步骤1.取活体菲牛蛭，沥干水分，称重记录；步骤2.根据称重重量，加入菲牛蛭重量1.5倍的水；步骤3.得到菲牛蛭匀浆；步骤4.用滴管吸取菲牛蛭浆1g，加入0.9％氯化钠溶液5ml，摇匀浸提30min，用滤纸过滤得滤液，进行滴定操作；整个滴定操作具体包括：取菲牛蛭浆1g，精密称定，精密加入0.9％氯化钠溶液5ml，充分搅拌，浸提30分钟，并时时振摇，过滤，精密量取续滤液100μl，置试管中，加入含0.5％纤维蛋白原，以凝固物计的三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液200μl，摇匀，置水浴中37℃±0.5℃，温浸5分钟，滴加每1ml中含有40单位的凝血酶溶液，每1分钟滴加1次，每次5μl，边滴加边轻轻摇匀至凝固，记录消耗凝血酶溶液的体积，按以下公式计算：U＝C1V1C2V2，其中U为每1g含凝血酶活性单位，Ug；C1为凝血酶溶液的浓度，μml；C2为供试品溶液的浓度，gml；V1为消耗凝血酶溶液的体积，μl；V2为供试品溶液的加入量，μl；三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液配置：取0.2molL的三羟甲基氨基甲烷溶液25ml与0.1molL的盐酸溶液约40ml，加水至100ml，调节pH值至7.4；步骤5.根据以上滴定检测的结果，x值即为步骤4所得U值，将所得U值带入到推导的公式y＝10.287x-13.211中，计算后所得结果即为本批菲牛蛭原料制成冻干粉之后预期活性，x表示的含义是菲牛蛭浆的活性检测结果，y表示的含义是对应批次原料制成冻干粉后活性的预测值，即多少个抗凝血酶活性单位。

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