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一种检测PCM1-JAK2融合基因的多重PCR方法、引物探针组合与试剂盒 

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申请/专利权人:天津见康华美医学诊断技术有限公司

摘要:本发明涉及生物医学技术领域,提供了一种检测PCM1‑JAK2融合基因的多重PCR方法、引物探针组合与试剂盒,引物探针组合包括引物探针组合A1和引物探针组合A2:引物探针组合A1包括上游引物PCM1‑E23‑F、PCM1‑E26‑F、PCM1‑E28‑F、PCM1‑E30‑F、PCM1‑E36‑F、下游引物JAK2‑E9‑R、JAK2‑E12‑R和探针JAK2‑E9‑Probe、JAK2‑E12‑Probe,引物探针组合A2包括上游引物PCM1‑E23‑F、PCM1‑E26‑F、PCM1‑E28‑F、PCM1‑E30‑F、PCM1‑E36‑F、下游引物JAK2‑E11‑R和探针JAK2‑E11‑Probe,试剂盒包括检测体系PCR反应液、淋巴细胞分离液,通过将引物探针分为两个组合,最大限度的涵盖各种融合方式,减少引物数量,防止相互干扰,本发明设计的引物探针组合可同时检测已知的融合方式及可能存在的未知融合方式,能够同时检测各种融合方式,降低检测成本;采用了基于Taqman探针的多重PCR技术,保证了检测扩增的特异性。

主权项:1.一种检测PCM1-JAK2融合基因的引物探针组合,其特征在于,所述引物探针组合包括引物探针组合A1和引物探针组合A2:所述引物探针组合A1包括上游引物PCM1-E23-F、PCM1-E26-F、PCM1-E28-F、PCM1-E30-F、PCM1-E36-F、下游引物JAK2-E9-R、JAK2-E12-R和探针JAK2-E9-Probe、JAK2-E12-Probe,其碱基序列如下所示:PCM1-E23-F:CCAGCCTGGCATCTAAAGATAPCM1-E26-F:CTAGTGAGAGCCTTGCTACTACPCM1-E28-F:CTGGTGCAGGTACTACAGTTPCM1-E30-F:TGATGAGAGCAAAGAGTTTGTAAAGPCM1-E36-F:GCTGGAAGTCCTGATACTGAJAK2-E9-R:ATGTGCATCTGCAGTTAATCTATAAJAK2-E12-R:TGTTGGTGAGGTTGGTACATCJAK2-E9-Probe:FAM-CCATCAATTAATGACACGAAAGACA-MGBJAK2-E12-Probe:HEX-ACACCATTCGTTCTGAAGACTAGA-MGB所述引物探针组合A2包括上游引物PCM1-E23-F、PCM1-E26-F、PCM1-E28-F、PCM1-E30-F、PCM1-E36-F、下游引物JAK2-E11-R和探针JAK2-E11-Probe,其碱基序列如下所示:PCM1-E23-F:CCAGCCTGGCATCTAAAGATAPCM1-E26-F:CTAGTGAGAGCCTTGCTACTACPCM1-E28-F:CTGGTGCAGGTACTACAGTTPCM1-E30-F:TGATGAGAGCAAAGAGTTTGTAAAGPCM1-E36-F:GCTGGAAGTCCTGATACTGAJAK2-E11-R:GAACAGTTTCCATCTGGTAACAATJAK2-E11-Probe:JOE-CACTGAGGTTGTACTCTTCATTCT-MGB。

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