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申请/专利权人:南京金斯瑞生物科技有限公司
摘要:本发明提供了一种对sgRNA序列及其修饰进行鉴定的方法,具体包括RNaseH在检测sgRNA序列及其修饰的应用。本发明通过探针结合长RNA,RNaseH酶切为短RNA,而后结合质谱法检测出RNA序列及其修饰。本发明避免了酶切为非常多的小段而导致的序列覆盖度低,相比普通测序还能检测RNA的修饰。本发明还提供了通用探针可用于sgRNA的质控。
主权项:1.一种鉴定sgRNA序列及其修饰的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:1探针结合:在反应缓冲液中加入RNaseH酶切割探针与sgRNA,退火以使探针与sgRNA结合;2酶切:加入RNaseH酶进行切割,酶切后进行灭活;3质谱测序:取酶切产物,进行一级质谱和二级质谱的分析检测。
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百度查询: 南京金斯瑞生物科技有限公司 一种对sgRNA序列及其修饰进行鉴定的方法
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