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申请/专利权人：天津中医药大学
摘要：本发明提供了一种液相色谱串联质谱法同时检测血清中20种氨基酸的方法和试剂盒，属于氨基酸检测技术领域。本发明提供的方法包括：对血清进行前处理，得到目标样品溶液；采用液相色谱串联质谱对目标样品溶液进行定性与内标法定量检测。本发明提供的方法和试剂盒仅通过对血清样本进行简单的蛋白沉淀反应及处理，无需衍生反应与固相萃取，简单易行；通过优化液相色谱条件，将样本分析时间控制在7min以内，缩短了检测时间；检测的氨基酸为常见的20种氨基酸，避免了通量过高引起的分析时间长、准确度低、分析成本高等问题，降低了检测多种氨基酸的成本。
主权项：1.一种液相色谱串联质谱法同时检测血清中20种氨基酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：1对血清进行前处理，得到目标样品溶液；2采用液相色谱串联质谱对目标样品溶液进行定性与内标法定量检测；所述内标法定量检测包括由九个浓度的混合标准品溶液预处理后制作标准曲线，得到线性回归方程，并以此计算目标样品溶液中的氨基酸含量；其中，所述20种氨基酸包括甘氨酸Gly、牛磺酸Tau、亮氨酸Leu、异亮氨酸Ile、甲硫氨酸Met、苯丙氨酸Phe、酪氨酸Tyr、色氨酸Trp、丝氨酸Ser、脯氨酸Pro、缬氨酸Val、苏氨酸Thr、羟脯氨酸Hyp、天冬酰胺Asn、谷氨酰胺Gln、赖氨酸Lys、瓜氨酸Cit、鸟氨酸Orn、组氨酸His、精氨酸Arg；所述液相色谱条件为：色谱柱：HPLCcolumnShim-packScepterDiol-HILIC-120；流动相A：0.05vt％～0.2vt％的甲酸水溶液；流动相B：0.1vt％-0.2vt％甲酸的乙腈溶液；流速：0.3mLmin～0.45mLmin；柱温：35℃～45℃；进样量：2μL～8μL；梯度洗脱；所述质谱的条件为：离子源：电喷雾离子源；离子化方式：用正离子电离模式；扫描方式：多反应监测；毛细管电压：3.5KV；去溶剂流速：800Lh～1000Lh，锥孔气体流速：100Lh～150Lh；去溶剂气温度：300℃～500℃，离子源温度：150℃。
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权利要求：
百度查询： 天津中医药大学 一种液相色谱串联质谱法同时检测血清中20种氨基酸的方法和试剂盒
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