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申请/专利权人：成都医学院
摘要：本发明公开了一种检测EGFR基因突变的电化学传感器及其制备方法，属于生物传感器技术领域。本发明解决了现有技术中EGFR突变基因的检测方法存在的数据处理复杂、费用昂贵、检测周期长以及侵入性大等问题。本发明设计一对茎环序列引物取代常规LAMP引物，避免了多引物间的交叉杂交产生的非特异性扩增；以GDY‑AuTNPs作为传感平台提高检测灵敏度，并修饰亚甲基蓝‑单链DNA作为报告基因。当LAMP产物中存在靶标DNA时，形成DNAcrRNACas12a三联体复合物，激活Cas12a的反式切割能力，切割报告基因，使电极上的氧化还原介质发生变化，并通过电化学方法检测整个信号变化。本发明达到了即时、快速、低成本的检测EGFR基因突变的目的，为临床医生诊断疾病、评估治疗效果提供强有力的技术支撑。
主权项：1.一种检测EGFR基因突变的电化学传感器，其特征在于：包括传感器平台、连接启动的LAMP靶标核酸扩增体系以及Cas12a-crRNA双链体；所述传感器平台包括工作电极和修饰在工作电极表面上的具有导电性能的复合纳米层，所述复合纳米层上设置有由报告基因组成的DNA单层，所述报告基因为亚甲基蓝-单链DNA；所述连接启动的LAMP靶标核酸扩增体系包括：茎环LAMP探针LP、茎环LAMP探针LP-PAM、前内引物FIP、后内引物BIP，所述连接启动的LAMP靶标核酸扩增体系用于通过连接启动的LAMP扩增靶标核酸，并得到DNA结构混合物；所述Cas12a-crRNA双链体用于特异性识别DNA结构混合物中的EGFR基因的E746-A750缺失突变基因MutDNA，并在识别后激活Cas12a的反式切割活性，将报告基因从工作电极上非特异性切割脱落。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 成都医学院 一种检测EGFR基因突变的电化学传感器及其制备方法
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