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申请/专利权人：西安交通大学
摘要：本发明公开了一种基于DNA共价交联的质粒组装方法，本方法巧妙运用交联剂实现来源于质粒的DNA进行链间交联，提高了双链交联引物在变性剂及高温下的抗变性能力。相较于利用未组装的引物通过PCR过程进行组装，经过交联的双链交联引物在PCR过程中展示出更高效高产的组装性能。而将该交联引物运用于质粒的DNA组装中，只需要经过一次普通的PCR反应即能实现，因此该方法简便易行，发展前景好。
主权项：1.一种基于DNA共价交联的DNA片段组装方法，其特征在于，包括以下步骤：1按照交联引物的功能设计用于组装的交联引物序列，包括构成杂交双链的两条单链核酸，长度依据实际组装片段而定；其中：一条单链核酸的5'-3'方向依次包含交联区1和目标片段1的反向引物，另外一条单链核酸的5'-3'方向依次包含交联区2和目标片段2的正向引物，两个交联区能够特异性互补；2利用步骤1设计的两条单链核酸制备交联引物；制备交联引物的方法为：首先按照等物质的量混合两条单链核酸，之后从95℃至20℃进行复性杂交形成杂交双链，配制交联溶液体系，利用交联剂产生DNA双链链间交联；加入的交联剂能够在DNA链间形成稳定共价双键；3将步骤2制备的交联引物与目标片段1的正向引物、目标片段2的反向引物加入PCR体系，待组装的DNA片段作为PCR反应的模板，经常规PCR反应制得组装产物。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 西安交通大学 一种基于DNA共价交联的质粒组装方法
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