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T4 DNA连接酶变体、其应用及试剂盒 

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申请/专利权人:翌圣生物科技(上海)股份有限公司

摘要:本发明提供了一种T4DNA连接酶变体,系删除了T4DNA连接酶的部分序列而成,删除的序列位于野生型T4DNA连接酶的一个Loop结构内,实验结果证实有效提高了热稳定性。本发明在野生型T4DNA连接酶删除了部分氨基酸残基的基础上进行进一步突变,进一步改善了T4DNA连接酶的性能,包括以下一个或至少两个的特性的改善:热稳定性提高、比活力提高、接头‑接头自连比例降低、DNA建库产量提高等。

主权项:1.一种T4DNA连接酶变体,其特征在于:为如下a1-a3中任一所述的蛋白质:a1:在氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的T4DNA连接酶的基础上删除220-254位氨基酸残基中的至少一个氨基酸残基;或者在氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的T4DNA连接酶的基础上删除220-254位氨基酸残基中的6-18个氨基酸残基;或者在氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的T4DNA连接酶的基础上删除224-247位氨基酸残基中的至少一个氨基酸残基;或者在氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的T4DNA连接酶的基础上删除224-247位氨基酸残基中的6-18个氨基酸残基;a2:将a1所示的氨基酸序列经过除前述截短以外的一个或几个氨基酸残基的取代和或缺失和或添加得到的具有基本相同的酶活性及性能的蛋白质;a3:与a1的蛋白质具有至少90%的序列同一性,且酶活性及性能与a1的蛋白质基本相当的蛋白质。

全文数据:

权利要求:

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