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申请/专利权人：扬州大学
摘要：本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9敲除鸡EphrinA2基因的细胞系的构建方法，包括如下步骤：设计特异性靶向鸡源EphrinA2基因的sgRNA；构建含有Cas9蛋白基因和特异性靶向鸡源EphrinA2基因的sgRNA的敲除质粒；对细胞进行转染，利用CRISPR‑Cas9系统达到基因沉默，随后通过亚克隆获得鸡源EphrinA2敲除细胞。本发明获得鸡源EphrinA2基因敲除的细胞模型，不仅方法成本低、效率高、简单易用，并且所构建的敲除鸡EphrinA2基因细胞系细胞活性显著降低，为解析EphrinA2在鸡体内中的功能作用及其在某些病毒入侵宿主中的作用与机制提供帮助。
主权项：1.一种基于CRISPR-Cas9敲除鸡EphrinA2基因的细胞系的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：1构建特异性靶向鸡EphrinA2基因的sgRNA，所述sgRNA位于鸡EphrinA2基因的第一个外显子区域，其靶序列唯一；2构建含有Cas9蛋白基因和上述特异性靶向鸡EphrinA2基因的sgRNA的敲除质粒；3将步骤2构建的敲除质粒对细胞进行转染，利用CRISPR-Cas9系统达到基因沉默，随后通过亚克隆的方法获得单克隆细胞株，从而获得鸡源EphrinA2敲除的细胞系。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 扬州大学 一种基于CRISPR-Cas9敲除鸡EphrinA2基因的细胞系的构建方法
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