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申请/专利权人：中国农业大学三亚研究院;中国农业大学;中国热带农业科学院椰子研究所
摘要：本发明公开了一种基于CRISPRCas12a方法检测槟榔黄化植原体的引物组、试剂盒及其使用方法，所述引物包括SEQIDNO.1所示的上游引物序列，SEQIDNO.2所示下游引物序列。所述试剂盒包括用于扩增待测DNA的引物、核酸扩增试剂、crRNA、ssDNA荧光报告探针、Cas12a酶。试剂盒的检测方法如下：S1、提取待检测样本的DNA；S2、对步骤S1中获得的DNA进行扩增；S3、将crRNA、ssDNA荧光报告探针和Cas12a酶与步骤S2中得到的核酸扩增产物混合进行反应，对反应产物进行检测；S4、通过荧光检测确定检测结果。本发明设计的引物组特异性强，检测的灵敏度高，是普通PCR扩增的100倍，检测限可达2.29×102拷贝μL，响应速度快，结果判定简单，操作简便。
主权项：1.一种基于CRISPRCas12a方法检测槟榔黄化植原体的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括用于扩增待测DNA的引物、核酸扩增试剂、crRNA、ssDNA荧光报告探针、Cas12a酶；所述引物包括SEQIDNO.1所示序列的上游引物，SEQIDNO.2所示序列的下游引物；所述核酸扩增试剂为RPA或RAA扩增试剂；所述crRNA序列为SEQIDNO.3所示序列；所述ssDNA荧光报告探针的核苷酸序列为：6-FAM-TTATT-BHQ1。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国农业大学三亚研究院 中国农业大学 中国热带农业科学院椰子研究所 基于CRISPR/Cas12a方法检测槟榔黄化植原体的引物组、试剂盒及其使用方法
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