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申请/专利权人：江苏大学
摘要：本发明提供一种突变型热稳定性萤火虫荧光素酶及其制备方法，所述萤火虫荧光素酶的氨基酸序列为SEQIDNO.1所示，本发明利用基因工程的方法对萤火虫荧光素酶基因进行定点突变，通过引入E178K，E354K，H431R，A482T四个氨基酸位点的替换，获得一种突变型热稳定性萤火虫荧光素酶，并在酶蛋白N末端和C末端融合促溶标签，大大提高了表达的萤火虫荧光素酶的可溶性和热稳定性。该荧光素酶热稳定性高，在室温25℃下14天，能保持60～70％活性；35℃下保温60min，能够保持97％相对活性；40℃下保温25min，能够保持90％左右的相对活性；保温50～60min，能够保持50％左右的相对活性。
主权项：1.一种突变型热稳定性萤火虫荧光素酶，其特征在于，所述突变型热稳定性萤火虫荧光素酶的氨基酸序列为Photinuspyralis的野生型萤火虫荧光素酶的氨基酸序列中的第178位的谷氨酸被除谷氨酸以外的氨基酸取代、第354位的谷氨酸被除谷氨酸以外的氨基酸取代、第431位的组氨酸被除组氨酸以外的氨基酸取代、第482位的丙氨酸被除丙氨酸以外的氨基酸取代。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 江苏大学 一种突变型热稳定性萤火虫荧光素酶及其制备方法
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