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申请/专利权人:中国水产科学研究院黄海水产研究所
摘要:本发明涉及一种测定河口水中活的副溶血性弧菌的方法,属于资源与环境技术领域,所述方法包括1)设置电子等温基因扩增仪参数并开启升温;2)采集河口水样品;3)相等体积的样品分别加入到预装有环介导等温基因扩增(LAMP)反应体系的两个检测管中并密封;4)检测管分别置入电子等温基因扩增仪的一个检测通道中,对其中一个检测管施加特定的方波脉冲,之后开启检测;5)获得每个检测管中LAMP生化反应的速率曲线及时间峰值T;6)将T值代入工作曲线公式计算出两个检测管中样品的VP浓度;7)计算河口水样品中活性VP的浓度。本发明操作简便,可以实现现场检测,从采样到得到河口水中活性VP浓度的全部耗时不超过1h,且结果准确。
主权项:1.一种测定河口水中活的副溶血性弧菌的方法,其特征在于,所述方法包括1设置电子等温基因扩增仪参数并开启升温;2采集河口水样品;3相等体积的样品分别加入到预装有LAMP反应体系的两个检测管中并密封;4检测管分别置入电子等温基因扩增仪的一个检测通道中,对其中一个检测管施加特定的方波脉冲,以使检测管内样品中的细菌破裂,释放出DNA,施加在检测管上的方波脉冲电压为12V,电流为0.6A,频率为1.5kHz,波形为正、负方波,施加方波脉冲时电子等温基因扩增仪检测通道温度设置为42℃,施加时间18s,另一检测管不施加方波脉冲信号,然后两个检测管同时继续升温至61℃,两个检测管同时开启检测;5电子等温基因扩增仪自动化报告每个检测管中生化反应的速率曲线及时间峰值T;6将T值代入工作曲线公式计算出两个检测管中样品的副溶血性弧菌浓度;7计算河口水样品中活性副溶血性弧菌的浓度。
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权利要求:
百度查询: 中国水产科学研究院黄海水产研究所 一种测定河口水中活的副溶血性弧菌的方法
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