恭喜华南理工大学成军虎获国家专利权
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龙图腾网恭喜华南理工大学申请的专利一种免标记荧光传感器特异性检测虾过敏原的方法及免标记荧光传感器获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115877014B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-13发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211604932.8,技术领域涉及:G01N33/68;该发明授权一种免标记荧光传感器特异性检测虾过敏原的方法及免标记荧光传感器是由成军虎;张新雪;马骥设计研发完成,并于2022-12-14向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种免标记荧光传感器特异性检测虾过敏原的方法及免标记荧光传感器在说明书摘要公布了:本发明公开了一种免标记荧光传感器特异性检测虾过敏原的方法,包括以下步骤:使生物素修饰的原肌球蛋白适配体和互补链结合形成适配体‑互补链复合物,然后加入链霉亲和素修饰的纳米磁珠孵育并清洗,得到适配体‑互补链‑纳米磁珠复合物后与待检测的样品混合,然后磁分离,吸取上清液,并在上清液中加入三聚氰胺;孵育结束后加入MOPS和抗坏血酸进行振荡,加入CuSO4振荡得到的混合液避光孵育;测试混合液的荧光强度,得到样品中虾过敏原的含量。本发明还公开了一种免标记荧光传感器。本发明以DNA为模板合成具有聚集诱导发光特性的铜纳米团簇作为传感信号,以适配体为识别元件,对虾过敏原的检测具有高的灵敏度和特异性。
本发明授权一种免标记荧光传感器特异性检测虾过敏原的方法及免标记荧光传感器在权利要求书中公布了:1.一种免标记荧光传感器特异性检测虾过敏原的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)制备适配体-互补链-纳米磁珠复合物:使生物素修饰的原肌球蛋白适配体和互补链结合形成适配体-互补链复合物,然后加入链霉亲和素修饰的纳米磁珠孵育并清洗,得到适配体-互补链-纳米磁珠复合物;所述原肌球蛋白适配体的序列为5'-biotin-TACTAACGGTACAAGCTACCAGGCCGCCAACGTTGACCTAGAAGCACTGCCAGACCCGAACGTTGACCTAGAAGC-3';所述互补链为5'-TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTGCTTCTAGGTCAACGTT-3';所述使原肌球蛋白适配体和互补链结合形成适配体-互补链复合物,具体为:将原肌球蛋白适配体和互补链分别用Tris-HCl缓冲液稀释后混合,先在94~96℃加热5~10min,再在3~5℃反应10~30min,形成适配体-互补链复合物;所述加入链霉亲和素修饰的纳米磁珠孵育并清洗,得到适配体-互补链-纳米磁珠复合物,具体为:加入预先在磷酸盐缓冲液中洗涤的链霉亲和素修饰的纳米磁珠,然后在3~5℃孵育1~2h,采用Tris-HCl缓冲液清洗纳米磁珠,采用Tris-HCl缓冲液定容后得到100~500nM的适配体-互补链-纳米磁珠复合物的混合液;(2)将步骤(1)得到的适配体-互补链-纳米磁珠复合物与待检测的样品混合,然后进行磁分离,吸取上清液,并在上清液中加入三聚氰胺进行孵育,得到反应液;孵育结束后加入3-N-吗啉基丙磺酸和抗坏血酸进行振荡,之后加入CuSO4,再次振荡得到混合液,混合液避光孵育后,混合液中形成CuNCs;(3)测试步骤(2)得到的混合液的荧光强度,根据荧光强度定量分析,得到待检测的样品中虾过敏原的含量。
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