恭喜上海逆耳生物科技有限公司高翔获国家专利权
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龙图腾网恭喜上海逆耳生物科技有限公司申请的专利植物单细胞悬液、制备方法及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119162078B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-23发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411380340.1,技术领域涉及:C12N5/04;该发明授权植物单细胞悬液、制备方法及其应用是由高翔;严冰冰;蒋伟;苏小萤;黎兰;赵清设计研发完成,并于2024-09-30向国家知识产权局提交的专利申请。
本植物单细胞悬液、制备方法及其应用在说明书摘要公布了:本发明涉及到植物单细胞的制备,具体涉及植物单细胞悬液、制备方法及其应用,制备方法包括以下步骤:(1)选取生长状况良好的植物幼苗,将选取的幼苗放入预质壁处理液中,处理后,取中间叶鞘部分;(2)对处理好的叶鞘部分原生质体酶解液进行酶解处理;(3)对酶解后的原生质体进行纯化处理,得到植物单细胞悬液。本发明可高效、大量的制备植物原生质体,制备得到的原生质体存活率高,可供进行后续研究。例如植物生物育种、蛋白亚细胞定位、蛋白纯化等方面。
本发明授权植物单细胞悬液、制备方法及其应用在权利要求书中公布了:1.植物单细胞悬液的制备方法,其特征在于:具体制备步骤如下:S1.剪取生长情况良好、长度为1-6cm的植物幼苗,将植物幼苗静置在预质壁处理液中,黑暗条件下静置5~20min;S2.预质壁处理完成后,进行过滤,收集沉淀得到预酶解材料,将得到预酶解材料加入到酶解液中,进行酶解,避光,酶解时间为2~5h;S3.将酶解完的溶液与W5洗液进行混合后进行1-2次离心取沉淀,将沉淀与W5洗液混合得到纯化的单细胞悬液;步骤S1中所述的预质壁处理液为0.25~0.5M的甘露醇、0.4%~1.2%脯氨酸-海藻酸钠-玉米醇溶蛋白纳米颗粒的分散液,其中两者的体积比为2.5:1;其中所述的脯氨酸-海藻酸钠-玉米醇溶蛋白纳米颗粒的制备方法为:将50mg脯氨酸和1.0g玉米醇溶蛋白溶解在100ml质量分数为70%的乙醇溶液中得到脯氨酸-玉米醇溶蛋白乙醇溶液,称取100mg海藻酸钠溶解在300ml蒸馏水中,将配置好的脯氨酸-玉米醇溶蛋白乙醇溶液以0.1mlmin的速率滴加在海藻酸钠溶液中,边滴加边搅拌,待滴加完成后利用旋转蒸发仪将乙醇蒸干,经过冷冻干燥,得到脯氨酸-海藻酸钠-玉米醇溶蛋白纳米粉末;将得到的脯氨酸-海藻酸钠-玉米醇溶蛋白纳米粉末超声分散在水中,制备得到0.4%~1.2%脯氨酸-海藻酸钠-玉米醇溶蛋白分散液;所述W5洗液的配方为:CaCl2·2H2O125.0mmolL、NaCl154.0mmolL、KCl5.0mmolL、葡萄糖5.0mmolL、MES5.0mmolL,pH5.8。
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