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申请/专利权人：浙江海正药业股份有限公司

摘要：本发明涉及一种药物组合物，其包含英夫利西单抗、组氨酸缓冲体系、结构保护剂和表面活性剂，其中所述组氨酸缓冲体系中组氨酸的浓度为约1‑200mM，优选约5‑75mM，更优选约25‑45mM。

主权项：1.一种药物组合物，其包含英夫利西单抗、组氨酸缓冲体系、结构保护剂和表面活性剂，其中所述组合物中英夫利西单抗的浓度为5‑40mgml，所述组氨酸缓冲体系中组氨酸的浓度为1‑200mM，所述结构保护剂的浓度为0‑100mgml，所述表面活性剂的浓度为0.01‑1mgml。

全文数据：包含组氨酸缓冲体系的英夫利西单抗组合物技术领域[0001]本发明属于药学领域，具体涉及一种包含组氨酸缓冲体系的英夫利西单抗组合物。背景技术[0002]英夫利西单抗（infliximab，CAS#170277-31-3是一种人鼠嵌合单抗，其通过特异性结合人体内的TNF-α，阻止TNF-α与其细胞表面受体结合，从而阻断了TNF-α的生物学活性，最终减轻炎症反应并减少破骨细胞激活，达到控制并缓解症状的目的。英夫利西单抗可用于治疗类风湿性关节炎、银肩病、强制性脊柱炎、溃疡性结肠炎和克罗恩氏病等。[0003]但是，英夫利西单抗稳定性不够，会发生多种化学和物理降解，尤其是高级结构非常脆弱，容易发生结构变化，如变性、聚集和沉淀。这些降解或不稳定的产物会对生物制药的安全性产生很大的影响。特别是一些蛋白聚集物会激发人体的免疫反应，轻者会降低生物药物的疗效，重者甚至会造成病人的死亡。因此多聚体被认为是生物制药安全性的关键质量属性CQA，直接影响到英夫利西单抗的用药安全。抗体药物不仅仅需要在生产的时候能得到高纯度的产品，还要在运输、储存和使用过程中保持结构稳定。[0004]CN104159614A公开了改进的液体制剂，其包含在合适的缓冲剂、一种或更多种合适的稳定剂以及其他任选地选自合适的表面活性剂和张力剂的赋形剂中的合适量的治疗性蛋白。CN103402540A涉及一种非水性高浓度混悬剂，其包含含有输水集和降粘剂的载体和用赋形剂配制的抗体。发明内容[0005]在一方面，本发明涉及一种药物组合物，其包含英夫利西单抗、组氨酸缓冲体系、结构保护剂和表面活性剂，[0006]其中所述组合物中英夫利西单抗的浓度为约5-40mgml，所述组氨酸缓冲体系中组氨酸的浓度为约l-200mM，所述结构保护剂的浓度为约0-100mgml，所述表面活性剂的浓度为约0.〇l-lmgml。[0007]在一优选实施方案中，药物组合物中所述英夫利西单抗的浓度为约5-20mgml。[0008]在另一优选实施方案中，药物组合物中所述组氨酸的浓度为约5-75mM，优选约25-45mM，例如约25、30、35、40、45mM。[0009]在另一优选实施方案中，药物组合物中所述结构保护剂选自蔗糖、海藻糖及其组合，其中所述结构保护剂的浓度为约I〇-75mgml，优选约10-50mgml。[0010]在又一优选实施方案中，药物组合物中所述表面活性剂的浓度为约0.025-0.4mgml，优选约0·025-0·lmgml。[0011]在还一实施方案中，所述表面活性剂选自聚山梨酯20、聚山梨酯21、聚山梨酯40、聚山梨酯60、聚山梨酯61、聚山梨酯65、聚山梨酯80、聚山梨酯81、聚山梨酯85、泊洛沙姆、triton、十二烷基硫酸钠、月桂硫酸钠、辛基糖苷钠、月桂基-磺基甜菜碱、聚乙二醇、聚丙二醇及其组合，优选聚山梨醇酯80。[0012]在一实施方案中，所述药物组合物的pH值为约4.0-9.0，优选约4.5-8.0，更优选约5.2_7.2〇[0013]在优选的实施方案中，本发明的药物组合物包含：1英夫利西单抗5-20mgml，⑵蔗糖10-50mgm_l，[0014]3聚山梨酯800.025-0.1mgrnl,4组氨酸25-45IiiM;[0015]pH为约5.2-7.2。[0016]在又一方面，本发明涉及一种预防或治疗人类自身免疫相关疾病的方法，所述方法包括向有此需要的个体给药本发明的药物组合物。[0017]在还一方面，本发明还涉及本发明的药物组合物在制备用于预防或治疗人类自身免疫相关疾病的药物中的用途。[0018]在还一方面，本发明还涉及用于预防或治疗人类自身免疫相关疾病的药物组合物。[0019]在一实施方案中，所述人类自身免疫相关疾病包括但不限于类风湿性关节炎、银肩病、幼年特发性关节炎、强直性脊柱炎、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、斑块状银肩病等。具体实施方式[0020]一般定义和术语[0021]除非另有说明，本文所用的术语和短语具有下文所列的含义。特定的术语或短语在没有特别定义的情况下不应该认为是不确定的或不清楚的，而应该按照本领域技术人员通常理解的含义进行解释。当本文中出现商品名时，意在指代其对应的商品或其活性成分。[0022]术语“约”、“大约”当与数值变量并用时，通常指该变量的数值和该变量的所有数值在实验误差内（例如对于平均值95%的置信区间内）或在指定数值的±10%内，或更宽范围内。[0023]表述“包含”或与其同义的类似表述“包括”、“含有”和“具有”等是开放性的，不排除额外的未列举的元素、步骤或成分。表述“由…组成”排除未指明的任何元素、步骤或成分。表述“基本上由…组成”指范围限制在指定的元素、步骤或成分，加上任选存在的不会实质上影响所要求保护的主题的基本和新的特征的元素、步骤或成分。应当理解，表述“包含”涵盖表述“基本上由…组成”和“由…组成”。[0024]术语“任选”或“任选地”是指随后描述的事件或情况可能发生或可能不发生，该描述包括发生所述事件或情况和不发生所述事件或情况。例如，组合物任选地包含抗氧化剂涵盖包含或者不包含抗氧化剂的情况。[0025]除非另有说明，本文的百分比、份数等都按重量计。[0026]术语“组氨酸缓冲液”或“组氨酸缓冲体系”表示组氨酸与任选存在的用于调节pH的酸如盐酸、醋酸、硫酸等组合得到的缓冲体系。在表征制剂中的组氨酸缓冲体系时，通常使用的是其中的组氨酸的浓度的总和，包括其游离和电离形式。组氨酸缓冲液的实例包括但不限于组氨酸盐酸、组氨酸醋酸、组氨酸硫酸等。本发明优选的组氨酸缓冲液是组氨酸盐酸缓冲液。[0027]术语“碳水化合物”包括单糖、二糖、低聚糖和多糖。碳水化合物的实例包括但不限于果糖、葡萄糖、蔗糖、海藻糖、甘露糖、乳糖、甘露糖、麦芽糖、果糖、山梨糖、葡聚糖、糊精、环糊精、羟乙基淀粉或其组合。[0028]术语“氨基酸”包括氨基酸和或其药学上可接受的盐。氨基酸的实例包括但不限于丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷酰胺、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸或其组合。[0029]“药学上可接受的盐”是指与药学上可接受的无毒的碱或酸，包括无机或有机碱和无机或有机酸形成的盐。例如与以下无机酸形成的盐:例如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、磷酸或硝酸；或者与以下有机酸形成的盐：例如甲酸、乙酸、乙酰乙酸、丙酮酸、三氟乙酸、丙酸、丁酸、己酸、庚酸、十一烷酸、月桂酸、苯甲酸、水杨酸、烟酸、扑酸、苦味酸、十二烷基硫酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、柠檬酸、酒石酸、硬脂酸、乳酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、藻酸、马来酸、富马酸、D-葡糖酸、扁桃酸或抗坏血酸。[0030]术语“冻干”表示将溶液制剂在较低的温度下冻结成固态，然后在真空下使其中的水分不经液态直接升华成气态，最终使物料脱水的干燥技术。冻干包括但不限于冷冻、一次干燥和二次干燥。[0031]药物组合物和给药[0032]本发明的药物组合物中包含组氨酸缓冲体系。与现有技术中使用的磷酸盐缓冲体系相比，包含组氨酸缓冲体系的英夫利西单抗药物组合物的稳定性大大提高。[0033]具体地，本发明提供一种药物组合物，其包含英夫利西单抗、组氨酸缓冲体系、结构保护剂和表面活性剂。[0034]在一实施方案中，药物组合物中的英夫利西单抗的浓度为约5-40mgml，优选约5-20mgml〇[0035]在本发明的制剂中，组氨酸缓冲体系的实例包括但不限于组氨酸盐酸、组氨酸醋酸、组氨酸硫酸等，优选为组氨酸盐酸缓冲液。在一实施方案中，药物组合物中组氨酸缓冲体系的组氨酸的浓度为约l-200mM，优选约5-75mM，更优选约25-45mM，例如约25、30、35、40、45mM〇[0036]本发明的药物组合物可以包含结构保护剂。结构保护剂可以用于稳定药物组合物中活性成分的结构，在常温和冻干状态下提供保护性能。碳水化合物和氨基酸为常用的蛋白质药物的稳定剂。其还可作为冷冻保护剂和干燥保护剂，保护蛋白质在冻干过程中可能发生的变性。在一实施方案中，结构保护剂为碳水化合物、氨基酸或其组合。在优选的实施方案中，结构保护剂选自选自蔗糖、海藻糖及其组合，更优选为蔗糖。结构保护剂的浓度为约0-100mgml，优选约l〇-75mgml，更优选约10-50mgml，例如约25mgml。[0037]本发明的药物制剂还可以包含表面活性剂。表面活性剂为能改变通常降低液体表面张力或两相间界面张力的物质。表面活性剂具有两亲性，含有亲水基团和亲油基团。表面活性剂的实例包括但不限于聚山梨酯类、泊洛沙姆、triton、十二烷基硫酸钠、月桂硫酸钠、辛基糖苷钠、月桂基-磺基甜菜碱、聚乙二醇、聚丙二醇或它们的混合物。可以使用的聚山梨酯类表面活性剂有聚山梨酯20、聚山梨酯21、聚山梨酯40、聚山梨酯60、聚山梨酯61、聚山梨酯65、聚山梨酯80、聚山梨酯81、聚山梨酯85或其混合物，优选聚山梨酯80。在本发明的药物组合物中，表面活性剂的浓度可以为约0.0l-lmgml，优选约0.025-0.4mgml，最优选约0·025-0·lmgml。[0038]本发明的药物制剂可以任选地包含抗氧化剂，抗氧剂可以抑制药物制剂的氧化，提高药物的稳定性并有助于延长储存期。抗氧剂的实例包括但不限于抗坏血酸、色氨酸、蛋氨酸、谷胱甘肽、硫代硫酸钠、过氧化氢酶或其混合物。[0039]根据需要，本发明的药物组合物可以任选地包含螯合剂，螯合剂可以结合容易催化蛋白发生氧化的金属离子，从而提高其稳定性，包括但不限于氨基多羧酸、羟基氨基羧酸、N-取代甘氨酸、柠檬酸、烟酰胺、去铁胺和去氧胆酸盐及其混合物，例如乙二胺四乙酸EDTA、二乙三胺五乙酸DTPA、次氮基三乙酸NTA及它们的盐。所用的螯合剂可以游离酸、游离碱或盐的形式存在，也可以化合物或相应盐的无水合物、水合物或者其它溶剂化物的形式存在。[0040]本发明的药物制剂也可以任选地包含防腐剂，防腐剂可以抑制微生物的生长和繁殖，其包括但不限于间甲酚、苯酚、苯甲醇、苯扎氯铵、苯氧乙醇、对羟基苯甲酸甲酯及其混合物。[0041]pH的选择对于组合物的稳定性而言很关键，pH的选择应使得对应的活性物质保持稳定。此外，PH的选择还应当使得药物组合物中的其他成分能够保持其物理和化学性质，例如不会降解。作为优选的实施方案，适合的pH值为约4.0-9.0,优选约4.5-8.0,更优选约5.2-7.2,例如约5.7、6.7。[0042]本发明的药物组合物可以不需要额外添加张力剂，这样的张力剂例如氯化钠、氯化钟等。[0043]在本发明中，基于含水溶液或水例如注射用水配制药物组合物。[0044]在具体的实施方案中，本发明提供一种药物组合物，其包含：1英夫利西单抗5-20mgml，2蔗糖K-50mgml，[0045]3聚山梨酯800.025-0.1mgml,4组氨酸25-45mM:;[0046]pH为约5.2-7.2。[0047]本发明的药物组合物可以是水针制剂、冻干制剂、或者由冻干粉末和注射用水通过双腔卡氏瓶（dual-chambercartridge配制得到的制剂形式，可以通过皮下注射^、静脉注射1.1、肌肉注射1.!11.或其它非肠胃形式给药。[0048]有益效果[0049]本发明通过选用组氨酸作为英夫利西单抗的缓冲体系，大大提高了药物组合物及其冻干制剂特别是在高温和光照条件下的稳定性，在冻干状态下能够稳定地长期存储。[0050]实施例[0051]以下通过实施例对本发明进一步进行说明。这些实施例是用于说明本发明，而不应理解为对本发明的限制。在本文中，除非另外指明或者明显不适合，包括百分比在内的比例均按重量计。7”表示不含或者未检测到。[0052][0053]用注射用水配制英夫利西单抗药物组合物溶液，将产品进行冻干，冻干工艺见表1〇[0054]表1.英夫利西单抗冻干工艺[0056]对冻干前后的制剂分别进行高温和光照试验。[0057]高温试验:将样品置于40°C±2°C恒温箱中，分别于第1周和2周或者第2周和第4周取样检测；[0058]光照试验:将样品放置于光照箱（5°C±3°C，4500Lx±500Lx中，10天后取样。[0059]试剂和检测仪器[0060]试剂：[0061]英夫利西单抗，由浙江海正药业股份有限公司提供[0062]组氨酸，购自JTBaker[0063]鹿糖，购自MerckKGaA[0064]海藻糖，购自日本林原[0065]盐酸精氨酸，购自JTBaker[0066]聚山梨酯80，购自JTBaker[0067]仪器：[0068]Agilent1200液相色谱仪，购自美国Agilent公司[0069]SEC-HPLC色谱柱：日本TOSOH公司的TSK-GELG3000SWXL，7.8X300mm;流动相：0.02molL磷酸二氢钠、0.2molL氯化钠缓冲液、10%乙腈，pH7.0;流速:0.5mlmin;柱温：30°C;运行时间：30min;波长：280nm〇[0070]马尔文ZetasizerNano-ZSZEN3600动态光散射仪，购自马尔文。[0071]实施例1[0072]本实施例比较了目前市售的处方（制剂1和使用组氨酸缓冲液代替磷酸缓冲液制剂2对英夫利西单抗药物组合物稳定性的影响表2。[0073]表2.药物组合物的组成[0075]将表格1中的制剂1和制剂2冻干。[0076]对制剂1-2进行外观、可见异物检测，用SEC-HPLC检测多聚体含量，结果见表3。[0077]表3.制剂1和制剂2经过高温和光照后外观可见异物和多聚体含量[0079]*试验数据为平均值土标准偏差，重复3次，下同。[0080]多聚体含量常用来表示制剂的稳定性，多聚体含量越高，说明制剂稳定性越差。表3的结果表明，使用组氨酸制剂2代替磷酸盐制剂1作为缓冲液，水针制剂的稳定性有显著提升，多聚体含量较少。在冻干条件下制剂的稳定性均好于水针制剂的稳定性，且冻干制剂2的稳定性更好。[0081]实施例2[0082]本实施例比较了缓冲液种类对英夫利西单抗药物组合物的稳定性的影响。药物组合物的组成配方制剂3-4如表4所示。[0083]表4.药物组合物的组成[0085]英夫利西单抗在水溶液中粒径大小比较[0086]使用动态光散射技术马尔文ZetasizerNano-ZSZEN3600对两制剂在水溶液中的单抗粒径进行研究表5。含磷酸盐的制剂3的平均粒径大于含有组氨酸的制剂4,说明在组氨酸溶液中单抗相互作用较弱，较不易发生碰撞形成多聚体，稳定性较好。[0087]表5.制剂3-4在水溶液中的粒径大小[0088][0089]将制剂3和制剂4按照表1的冻干工艺冻干。比较冻干制剂在高温40°C±2°C，2周、4周）和光照（5°C±3°C，4500Lx±500Lx，10天条件下的稳定性表6。[0090]表6.冻干制剂3和制剂4经过高温和光照后外观可见异物和多聚体含量[0092]经过高温或光照后，相比以磷酸盐缓冲液配制的冻干制剂3，以组氨酸缓冲液配制的冻干制剂4具有更低的多聚体含量，即更高的稳定性。[0093]实施例3.[0094]在本实施例中，按表7配制各英夫利西单抗药物组合物（制剂5-8，其中pH采用盐酸进行调节。将制剂5-8用表1的冻干工艺冻干。冻干后进行高温40±2°C和光照（5°C±3°C，4500Lx±500Lx，10天）试验。[0095]表7.药物组合物的组成[0097]冻干制剂经受高温或光照后外观均为白色块状固体，溶解后为无色澄明液体，无可见异物。试验结束后用SEC-HPLC检测制剂5-8的多聚体含量，结果如表8所示。[0098]表8.制剂5-8经过高温和光照后多聚体含量（％[0099][0100]从表8可知，经过40°C高温后，pH越高，多聚体含量增加越明显。但在pH为4.7时制剂酸度较大，容易在注射时发生疼痛。在光照条件下，不同PH制剂的多聚体含量增加都不明显。[0101]实施例4.[0102]本实施例比较结构保护剂对英夫利西单抗药物组合物稳定性的影响。按表9配制各英夫利西单抗药物组合物（制剂9-11，用表1的冻干工艺冻干。冻干后进行高温40±2°C和光照（4500±500Lx试验。[0103]表9.药物组合物的组成[0105]冻干制剂经受高温或光照后外观均为白色块状固体，溶解后为无色澄明液体，无可见异物。试验结束后用SEC-HPLC检测制剂9-11的多聚体含量，结果见表10。[0106]表10.制剂9-11经过高温和光照后多聚体含量（％[0107][0108]~从表10可知，经过高温或光照试验后，蔗糖和海藻糖对于英夫利西单抗药物组合物的稳定作用相当（制剂9、10多聚体含量增加均不明显），均优于盐酸精氨酸的稳定作用。[0109]实施例5.[0110]本实施例比较表面活性剂浓度对英夫利西单抗药物组合物稳定性的影响。按表11配制各英夫利西单抗药物组合物（制剂12-14，将制剂12-14用表1的冻干工艺冻干。冻干后进行高温40±2°C和光照（4500±500Lx试验。[0111]表11.药物组合物的组成[0113]冻干制剂经受高温或光照后外观均为白色块状固体，溶解后为无色澄明液体，无可见异物。试验结束后用SEC-HPLC检测制剂12-14的多聚体含量，结果见表12。[0114]表12.制剂12-14经过高温和光照后多聚体含量（％[0115][0116]从表12可知，聚山梨酯80在浓度为0.025-0.4mgml，特别是0.025-0.lmgml的范围内，多聚体含量增加都不明显，英夫利西单抗药物组合物的稳定性都在可接受范围内。[0117]实施例6.[0118]本实施例比较了不同浓度组氨酸缓冲体系对英夫利西单抗药物组合物稳定性的影响。按表13配制英夫利西单抗药物组合物制剂15-21，进行高温40±2°C和光照4500±500Lx试验。[0119]表13.药物组合物的组成[0121]试验结束后进行了外观可见异物检测，并用SEC-HPLC检测多聚体含量，结果见表14〇[0122]如表14所示，随着组氨酸浓度的上升，在高温条件下，多聚体含量先逐渐下降（制剂15-19，随后又逐渐上升制剂20-21。在光照条件下制剂的稳定性对组氨酸的浓度变化更敏感，随组氨酸浓度的升高，制剂15-17的多聚体含量逐渐降低，制剂18-20的多聚体含量逐渐上升。此外，制剂19-21在经过高温2周或光照以后颜色有加深，且部分样品出现了肉眼可见异物。在测试的制剂中，制剂16-18,特别是制剂17的稳定性结果特别优异。[0123]表14.制剂15-21经过高温和光照后多聚体含量（％[0125]除非另有说明，本说明书包括权利要求书）中使用的所有表示成分、细胞培养、处理条件等的量的数字应当理解为在所有条件下受到术语“约”的修饰。因此，除非另有相反的说明，数值参数为近似值，并且可以根据通过本发明试图获得的期望特性而变化。除非另有说明，一系列元素之前的术语“至少”应当理解为指该系列中的每个元素。本领域技术人员会认识到或者能够利用不超过常规实验确定本文所述的本发明的具体实施方案的许多等同物。所附权利要求书意图涵盖这类等同物。[0126]本领域技术人员会清楚，可以进行本发明的许多修改和变化而不背离其精神和范围。本文所述的具体实施方案仅通过实例的方式提供，并不意味着以任何方式限制。本发明的真正范围和精神通过所附权利要求书示出，说明书和实施例仅是示例性的。

权利要求：1.一种药物组合物，其包含英夫利西单抗、组氨酸缓冲体系、结构保护剂和表面活性剂，其中所述组合物中英夫利西单抗的浓度为5-40mgml，所述组氨酸缓冲体系中组氨酸的浓度为l-200mM，所述结构保护剂的浓度为0-100mgml，所述表面活性剂的浓度为0.01-lmgml〇2.权利要求1的药物组合物，其特征在于，所述英夫利西单抗的浓度为5-20mgml。3.权利要求1或2的药物组合物，其特征在于，所述组氨酸的浓度为5-75mM，优选25-45mM，更优选45mM。4.权利要求1-3中任一项的药物组合物，其特征在于，所述结构保护剂选自蔗糖、海藻糖及其组合，其中所述结构保护剂的浓度为I〇-75mgml，优选10-50mgml。5.权利要求1-4中任一项的药物组合物，其特征在于，所述表面活性剂的浓度为0.025-0·4mgml，优选0·025-0·lmgml。6.权利要求5的药物组合物，其特征在于，所述表面活性剂选自聚山梨酯20、聚山梨酯21、聚山梨酯40、聚山梨酯60、聚山梨酯61、聚山梨酯65、聚山梨酯80、聚山梨酯81、聚山梨酯85、泊洛沙姆、triton、十二烧基硫酸钠、月桂硫酸钠、辛基糖苷钠、月桂基-磺基甜菜碱、聚乙二醇、聚丙二醇及其组合，优选聚山梨醇酯80。7.权利要求1-6中任一项的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物的pH值为4.Ο-ΐ0,优选4.5-8.0,更优选5.2-7.2。8.根据权利要求1-7中任一项的药物组合物在制备用于预防或治疗人类自身免疫相关疾病的药物中的用途。9.根据权利要求8的用途，其特征在于，所述疾病包括类风湿性关节炎、银肩病、幼年特发性关节炎、强直性脊柱炎、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、斑块状银肩病。

百度查询： 浙江海正药业股份有限公司 包含组氨酸缓冲体系的英夫利西单抗组合物