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申请/专利权人:广东工业大学
摘要:本发明涉及艰难梭菌无细胞基因表达体系及基于该体系的遗传元件表征方法。所述体系包括艰难梭菌细胞提取物,线性DNA模板,镁离子,钾离子,氨基酸,聚乙二醇8000,T7RNA聚合酶、能量再生缓冲液。本发明的体系直接使用线性片段而不是质粒,可以在有氧气的情况下完成艰难梭菌启动子强度表征,具有系统开放,操作灵活,使用简单等优点,另外也极大的简化了利用该系统进行启动子强度表征的程序,节约了大量的用于构建质粒、接合的时间。本发明可以在体外模拟艰难梭菌的转录、翻译,应用于合成生物学基因元件的构建,以及帮助进行艰难梭菌转录调控研究。
主权项:1.一种艰难梭菌无细胞基因表达体系,其特征在于,所述体系包括艰难梭菌细胞提取物,线性DNA模板,镁离子,钾离子,氨基酸,聚乙二醇8000,能量再生缓冲液,所述能量再生缓冲液中包括HEPES缓冲液,腺苷5′-三磷酸,鸟苷-5'-三磷酸,胞苷5'-三磷酸,尿苷-5'-三磷酸,大肠杆菌转运RNA,辅酶A,β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸,腺苷环磷酸,亚叶酸,亚精胺,3-磷酸甘油酸。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 广东工业大学 一种艰难梭菌无细胞基因表达体系及应用
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