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申请/专利权人:贵州工程应用技术学院
摘要:本发明公开了一种检测山羊OPN4基因CNV标记的方法及其应用:基于实时荧光定量PCR,以贵州白山羊、贵州黑山羊的基因组DNA为模板,扩增山羊OPN4基因的CNV标记位点,再以扩增的山羊MC1R基因部分片段作为内参,然后通过2*2‑ΔΔCt的方法计算并判定个体的拷贝数变异类型。本发明可在DNA水平上检测与山羊地方品种生长性状密切相关的CNV标记,加快山羊良种繁育速度,并且该方法简单、快速,便于推广应用。
主权项:1.一种检测山羊OPN4基因CNV标记的方法在山羊分子标记辅助选择育种中的应用,其特征在于:所述检测山羊OPN4基因CNV标记的方法包括以下步骤:以山羊基因组DNA为模板,分别通过实时定量PCR扩增OPN4基因的CNV区域部分片段及作为参考的MC1R基因的部分片段,然后根据定量结果鉴定山羊OPN4基因的拷贝数变异类型;所述的CNV区域定位于山羊OPN4基因参考基因组序列NC_030835.1的4401501位到4403500位;所述的拷贝数变异类型是根据2*2-∆∆Ct将定量结果分为的三类:多拷贝型,2*2-∆∆Ct2;缺失型,2*2-∆∆Ct2;正常型,2*2-∆∆Ct=2;所述的OPN4基因的CNV区域部分片段的扩增引物对为:上游引物F:5’-CGTGATACCAGGCTCCAGA-3’下游引物R:5’-ACGGCGAGGTTGATAATGA-3’;所述的MC1R基因的部分片段的扩增引物对为:上游引物F:5’-CTCGTTGGCCTCTTCATAGC-3’下游引物R:5’-GAAGTTCTTGAAGATGCAGCC-3’;所述山羊为贵州白山羊或贵州黑山羊;具有缺失型拷贝数变异类型的贵州黑山羊个体的体长较短,具有正常型拷贝数变异类型的贵州白山羊个体体重较大。
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