申请/专利权人：江西师范大学

申请日：2021-06-30

公开（公告）日：2023-04-11

公开（公告）号：CN113624815B

主分类号：G01N27/30

分类号：G01N27/30;G01N27/327;G01N27/48

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.04.11#授权;2021.11.26#实质审查的生效;2021.11.09#公开

摘要：本发明公开了一种基于三维DNAWalker和MOF‑FeII诱导滕氏蓝生成的双信号miRNA‑21检测方法。该方法是将亲和素修饰的MB与生物素修饰的发夹链H1混合孵育后，再与发夹链H2‑AuNP‑GOx探针及miRNA‑21溶液混合孵育，得到DNAWalker产物；在葡萄糖溶液中加入DNAWalker产物进行催化反应，磁性分离，得到含过氧化氢的溶液；再利用MOF‑FeII与含过氧化氢的溶液反应并在电极诱导TB生成，以实现电化学检测，或者利用MOF‑FeII含过氧化氢的溶液并在溶液中诱导TB生成，以实现光热检测，从而可以用于miRNA的双信号检测，且对miRNA目标物检测下限低、选择性高。

主权项：1.一种基于三维DNAWalker和MOF-FeII诱导滕氏蓝生成的双信号miRNA-21检测方法，其特征在于：包含以下步骤：1将亲和素修饰的MB与生物素修饰的发夹链H1混合孵育后，所得产物与发夹链H2-AuNP-GOx探针及miRNA-21溶液混合孵育，得到DNAWalker产物；在葡萄糖溶液中加入所述DNAWalker产物进行催化反应，磁性分离DNAWalker产物，得到含过氧化氢的溶液；2在电极表面滴加MOF-FeII分散液，干燥，再在电极表面滴加所述含过氧化氢的溶液，进行孵育，再在电极表面滴加铁氰化钾溶液，进行反应，反应完成后，将电极置于缓冲溶液中进行电化学检测，得到电流响应值；3将一系列不同浓度的标准miRNA-21溶液替换步骤1中的miRNA-21溶液进行步骤1和步骤2，得到一系列电流响应值，并构建miRNA-21浓度与电流响应值之间的标准曲线；4将待测miRNA-21溶液替换步骤1中的miRNA-21溶液进行步骤1和步骤2，获得相应电流响应值，并根据标准曲线计算待测miRNA-21溶液的浓度；或者，包含以下步骤：I将亲和素修饰的MB与生物素修饰的发夹链H1混合孵育后，所得产物与发夹链H2-AuNP-GOx探针及miRNA-21溶液混合孵育，得到DNAWalker产物；在葡萄糖溶液中加入所述DNAWalker产物进行催化反应，磁性分离DNAWalker产物，得到含过氧化氢的溶液；II在MOF-FeII分散液中所述含过氧化氢的溶液，进行孵育，再加入铁氰化钾溶液，进行反应，反应完成后，进行光热检测，得到温度响应值；III将一系列不同浓度的标准miRNA-21溶液替换步骤I中的miRNA-21溶液进行步骤I和步骤2，得到一系列温度响应值，并构建miRNA-21浓度与温度响应值之间的标准曲线；IV将待测miRNA-21溶液替换步骤I中的miRNA-21溶液进行步骤I和步骤II，获得相应温度响应值，并根据标准曲线计算待测miRNA-21溶液的浓度。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 江西师范大学 一种基于三维DNA Walker和滕氏蓝的双信号miRNA-21检测方法

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