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一种制备飞蝗Lmzen纯合突变体的方法、RNP复合物及应用 

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申请/专利权人:山西大学

摘要:本发明属于飞蝗生物技术和基因编辑技术领域,具体涉及一种制备飞蝗Lmzen纯合突变体的方法、RNP复合物及应用,一种制备飞蝗Lmzen纯合突变体的方法,其包括以下步骤:1构建Lmzen基因敲除RNP复合物,其包括从5’端到3’端的以下可操作性连接的元件:T7启动子,Lmzen基因靶点和tracRNA‑crRNA所转录而成的RNAsgRNA;Cas9蛋白;ddH2O;2将步骤1所述的Lmzen基因敲除RNP复合物共转新鲜飞蝗卵,孵化,得G0代,将G0代与野生型杂交得G1代;3将步骤2所述G1代自交,获得的G2代,即为飞蝗Lmzen纯合突变体。本发明利用CRISPRCas9技术敲除飞蝗zen基因,提供了稳定有效的Lmzen纯合突变体品系。首次敲除飞蝗zen基因,成功实现了纯合突变体的构建,其后代具有大量死亡表型。

主权项:1.一种制备飞蝗Lmzen纯合突变体的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)构建Lmzen基因敲除RNP复合物,其包括从5’端到3’端的以下可操作性连接的元件:T7启动子,Lmzen基因靶点和tracRNA-crRNA所转录而成的RNA;Cas9蛋白;ddH2O;所述Lmzen基因是指飞蝗zerknüllt基因;所述LmZen基因靶点的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示;2)将步骤1)所述的Lmzen基因敲除RNP复合物共转新鲜飞蝗卵,孵化,得G0代,将G0代与野生型杂交得G1代;3)将步骤2)所述G1代自交,获得的G2代,即为飞蝗Lmzen纯合突变体。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 山西大学 一种制备飞蝗Lmzen纯合突变体的方法、RNP复合物及应用

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