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申请/专利权人：河南中医药大学
摘要：本发明公开了基于photo‑ATRP信号放大策略的ALP活性检测试剂盒及其使用方法，该试剂盒包括以下原料：电极、MPA、EDC、NHS、O‑磷酸乙醇胺、BIBB、DMSO、EY、Me6TREN、FMMA、LiClO4。本发明利用photo‑ATRP反应作为聚合反应信号放大策略显著提高了ALP活性检测的灵敏度，同时避免过渡金属催化剂的使用，具有高效、操作方便、环境友好的优点。在最佳实验条件下，该方法用于ALP活性检测的线性范围为10～150mUmL，检测限LOD为2.12mUmL，说明本发明方法具有良好的灵敏度。且本发明方法具有令人满意的选择性、抗干扰性、重现性及稳定性，该方法在临床血清样本及抑制率实验中均获得良好的实验结果。
主权项：1.一种基于photo-ATRP信号放大策略的ALP活性检测试剂盒，其特征在于，包括以下原料：电极、MPA、EDC、NHS、O-磷酸乙醇胺、BIBB、DMSO、EY、Me6TREN、FMMA、LiClO4；其使用方法，包括以下步骤：（1）3-巯基丙酸MPA修饰将金电极浸泡在MPA溶液中，在25~37℃下孵育2~8h；（2）MPA羧基的活化与修饰磷酸乙醇胺将步骤（1）所得电极浸泡在EDCNHS混合溶液中，在37℃下孵育0.5~1h，之后将电极浸泡在O-磷酸乙醇胺溶液中，在37℃下孵育1~2h；（3）ALP脱磷酸根和BIBB修饰将待检测溶液滴在步骤（2）所得电极表面，在37℃下孵育1~2h，之后将电极浸泡在BIBB溶液中，在37℃下孵育0.5~2h；（4）光介导ATRP反应将步骤（3）所得电极浸泡在photo-ATRP反应液中，使用蓝光照射，25~37℃反应3~6h；（5）SWV检测将步骤（4）所得电极浸入LiClO4溶液中，并进行方波伏安法SWV电化学测量；photo-ATRP反应液由5mL超纯水、3990μLDMSO、5μLEY溶液、5μLMe6TREN溶液和1mLFMMA溶液混合而成。
全文数据：
权利要求：
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