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【发明公布】一种小鼠原代近端肾小管上皮细胞分选方法_扬州大学_202311240016.5 

申请/专利权人:扬州大学

申请日:2023-09-25

公开(公告)日:2024-01-26

公开(公告)号:CN117448258A

主分类号:C12N5/071

分类号:C12N5/071;C12Q1/02;G01N33/68;C12Q1/6883

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.02.13#实质审查的生效;2024.01.26#公开

摘要:本发明公开了一种小鼠原代近端肾小管上皮细胞分选方法,利用梯度酶消化法,结合不同孔径筛网过滤和差速离心的方法去除免疫细胞、间质细胞和肾小球,得到纯化的肾小管节段,提高肾小管的纯度,使用异硫氰酸荧光素fluoresceinisothiocyanate,FITC耦联的翅荚百脉根凝集素lotustetragonolobuslectin,LTL标记近端肾小管上皮细胞,操作简单,且特异性较高,不需要经过细胞贴壁来进行细胞筛选;使用流式细胞仪分选阳性细胞,获得高纯度的小鼠近端肾小管上皮细胞,分离的小鼠原代近端肾小管上皮细胞可以直接用于转录组测序,RNA和蛋白质的提取,进一步分析不同状态下小鼠原代近端肾小管上皮细胞中的差异表达基因,探索不同肾脏疾病发病的机制。

主权项:1.一种小鼠原代近端肾小管上皮细胞分选方法,其特征在于:包括,使用异硫氰酸荧光素耦联的翅荚百脉根凝集素标记经过两次消化处理的原代小鼠近端肾小管上皮细胞,通过流式细胞仪分选阳性细胞,即获得高纯度的小鼠近端肾小管上皮细胞。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 扬州大学 一种小鼠原代近端肾小管上皮细胞分选方法

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