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申请/专利权人：广西壮族自治区农业科学院
申请日：2023-11-13
公开（公告）日：2024-02-13
公开（公告）号：CN117551682A
主分类号：C12N15/82
分类号：C12N15/82;A01H5/06;A01H6/54
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.03.01#实质审查的生效;2024.02.13#公开
摘要：本发明属于生物工程技术领域，具体公开了一种野葛毛状根诱导方法。本发明的野葛毛状根诱导方法，包括野葛组培苗叶片的处理、发根农杆菌K599的菌液活化培养、叶片外植体和重悬农杆菌液共培养、毛状根诱导和毛状根继代增殖。本发明的诱导方法操作简单，明显提高了野葛毛状根诱导率和共转化频率。
主权项：1.一种野葛毛状根诱导方法，其特征在于，包括以下步骤：1外植体处理：取野葛组培苗刚完全展开的幼嫩叶片，放入MS固体培养基中暗培养2-3d，得叶片外植体；2菌液活化培养：将K599发根农杆菌的菌液接种到含抗生素的YEB液体培养基中，于28℃、200r·min-1的条件下培养至其OD600为0.6-0.8，于4000rpm下离心10min，收集菌体，并用YEB液体培养基重悬，调整其OD600为0.5-0.7，得重悬农杆菌液；3共培养在超净工作台上，将所述叶片外植体转入所述重悬农杆菌液中，振荡培养15-20min后将所述叶片外植体取出，放置在无菌滤纸上晾干至表面没有明显菌液后转入MS固体培养基上暗培养2d；4毛状根诱导暗培养结束后，清洗所述叶片外植体的表面并用无菌滤纸吸干其表面水分，然后将其转入含cef的MS固体培养基中暗培养，且每隔7d用相同的培养基转接1次，即可诱导出毛状根；5毛状根继代增殖取诱导得到的生长状态稳定的毛状根转入MS固体培养基进行继代增殖，即可得到生长旺盛的野葛毛状根。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 广西壮族自治区农业科学院 一种野葛毛状根诱导方法
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