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申请/专利权人:中国医学科学院北京协和医院;中国医学科学院医学实验动物研究所
摘要:本发明提供了一种SQSTM1p62基因新致病突变c.1143delC的敲入小鼠模型及其构建方法,所述方法包括:获得核苷酸序列如SEQIDNO.2所示的gRNA1和核苷酸序列如SEQIDNO.3所示的gRNA2;获得有活性的Cas9mRNA;将所述gRNA、Cas9mRNA和核苷酸序列如SEQIDNO.1所示的打靶供体doner混合后显微注射到小鼠受精卵中,获得F0代小鼠;选择F0代阳性小鼠与野生型小鼠进行交配,获得具有稳定基因型的F1代小鼠;后筛选获得SQSTM1p62基因突变敲入模式小鼠。该方法基因编辑效率高,可表达人SQSTM1p62突变蛋白。
主权项:1.一种SQSTM1p62基因新致病突变c.1143delC的敲入小鼠模型的构建方法,其特征在于,所述方法包括:将核苷酸序列如SEQIDNO.2所示的gRNA1和核苷酸序列如SEQIDNO.3所示的gRNA2分别体外转录成mRNA,获得活性的gRNA1和gRNA2;获得有活性的Cas9mRNA;获得核苷酸序列如SEQIDNO.1所示的打靶供体;将所述gRNA1、gRNA2、Cas9mRNA和打靶供体混合后显微注射到小鼠受精卵中,获得F0代小鼠;选择F0代小鼠基因型鉴定结果中的F0代阳性小鼠,使其与野生型小鼠进行交配,从而获得具有稳定基因型的F1代小鼠;后筛选出发生正确重组的基因打靶小鼠,即获得SQSTM1p62基因敲入模式小鼠。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 中国医学科学院北京协和医院 中国医学科学院医学实验动物研究所 SQSTM1/p62基因新致病突变c.1143delC的敲入小鼠模型及其构建方法
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