申请/专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所

申请日：2023-02-17

公开（公告）日：2024-04-30

公开（公告）号：CN116519944B

主分类号：G01N33/68

分类号：G01N33/68;G01N33/569;G01N33/577;G01N33/543;G01N33/535

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.30#授权;2023.08.18#实质审查的生效;2023.08.01#公开

摘要：本发明公开了一种检测鸡新城疫病毒抗体的间接ELISA试剂盒，该ELISA试剂盒包括包被有NP18蛋白的包被抗原，其中该NP18蛋白的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示。该间接ELISA试剂盒及其相关ELISA检测方法一方面可检测鸡血清中是否存在新城疫病毒抗体，另一方面可以区分鸡新城疫疫苗MG7株免疫鸡血清和其他新城疫病毒感染鸡血清。

主权项：1.一种检测鸡新城疫病毒抗体的间接ELISA试剂盒，其特征在于，所述ELISA试剂盒包括包被有NP18蛋白的包被抗原，其中所述NP18蛋白的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示，其中所述包被抗原的包被浓度为50ng100μl；其中，所述ELISA试剂盒进一步包括阳性对照血清、阴性对照血清、酶标二抗液、洗涤液、显色液、封闭液、稀释液、终止液、封板膜和说明书；其中，所述阴性对照血清为鸡新城疫疫苗免疫鸡血清，所述鸡新城疫疫苗为鸡新城疫病毒MG7株标记疫苗；其中，所述阳性对照血清选自以下的一种或多种：基因Ⅶ型新城疫免疫鸡阳性血清、LaSota免疫鸡阳性血清和田间样品新城疫鸡阳性血清；其中，所述洗涤液为1×PBST洗涤液，所述1×PBST洗涤液的配置方法为：使用ddH2O将25倍浓缩PBST溶液稀释为1×PBST洗涤液；其中，所述显色液为TMB显色液；其中，所述封闭液为约2％BSA-1×PBST溶液；其中，所述稀释液为血清稀释液；其中，所述酶标二抗液为将HRP标记的山羊抗鸡IgG使用血清稀释液稀释4000倍制备而获得；其中，所述终止液为约0.3molL硫酸溶液；其中，将待检血清使用所述血清稀释液稀释100倍之后用于所述检测鸡新城疫病毒抗体的间接ELISA试剂盒；其中，所述NP18蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO：2所示；其中，所述NP18蛋白为NP蛋白优势抗原表位443aa～460aa经GGGSGG进行串联3次表达的蛋白，其中所述NP蛋白优势抗原表位443aa～460aa的氨基酸序列如SEQIDNO：3所示。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种鸡新城疫病毒抗体间接ELISA检测方法及其试剂盒

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