申请/专利权人:星汉德生物医药(大连)有限公司
申请日:2022-12-06
公开(公告)日:2024-06-07
公开(公告)号:CN118150832A
主分类号:G01N33/577
分类号:G01N33/577;G01N33/569;G01N33/58;G01N33/543
优先权:
专利状态码:在审-公开
法律状态:2024.06.07#公开
摘要:本发明提供了一种改进的双抗体夹心法检测p24蛋白含量的酶联免疫ELISA方法,可实现对大规模生产过程中慢病毒载体样品p24蛋白含量高的情况下,减少稀释倍数就可以检测,结果准确灵敏,且稳定性好,特异性高、操作简单、诊断速度快、成本较传统ELISA试剂盒低。使得高浓度的样品不需要进行很大的稀释倍数,方便生产过程中通过测定p24蛋白颗粒数和含量监测慢病毒载体的滴度,并可以通过一定阈值的设置作为慢病毒的放行标准,因此极大的简化了生产过程中慢病毒载体滴度监测,并大幅度降检测成本,具有广泛的应用前景。
主权项:1.一种慢病毒载体p24蛋白含量ELISA测定方法,其特征在于包括如下步骤:1Anti-HIV1p24antibody预包被酶标板;2上述预包被酶标板中加入一定浓度梯度的标准品和检测样品,振荡后洗板;3加入BiotinylatedAnti-HIV1p24Mab检测试剂,振荡后洗板;4加入链霉亲和素一辣根过氧化物酶偶联试剂,振荡后洗板;5加入TMB显色液,避光显色,加入终止液终止反应,用酶标仪在450620nm双波长下读板;6制作标准曲线,带入检测样品450620nm值即可计算检测样品p24蛋白含量;其中,检测样品的稀释倍数为100-400。
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权利要求:
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