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申请/专利权人：中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
申请日：2021-06-09
公开（公告）日：2024-06-14
公开（公告）号：CN113341160B
主分类号：G01N33/68
分类号：G01N33/68;G01N33/543
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.14#授权;2021.09.21#实质审查的生效;2021.09.03#公开
摘要：本发明公开了一种检测犬、羊等家畜细粒棘球绦虫感染的ELISA试剂盒；所述试剂盒中的包被抗原为重组细粒棘球绦虫14‑3‑3ζ蛋白。本发明首次克隆、表达出细粒棘球绦虫重组蛋白rEg14‑3‑3ζ；免疫印迹显示，重组蛋白具有良好的反应原性；发现rEg14‑3‑3ζ免疫小鼠后，诱导产生良好的体液和细胞免疫反应，主要诱导产生Th1型免疫应答。进一步的，本发明基于rEg14‑3‑3ζ蛋白建立了检测细粒棘球绦虫抗体的间接ELISA方法，制备了ELISA试剂盒，具有较好的敏感性、特异性和重复性，为家畜细粒棘球绦虫感染及囊型包虫病流行病学调查和诊断提供了一种有效的方法。
主权项：1.一种重组细粒棘球绦虫14-3-3ζ蛋白在制备检测囊型包虫病及犬细粒棘球绦虫感染的特异性抗体和或试剂盒中的应用；所述重组细粒棘球绦虫14-3-3ζ蛋白是以细粒棘球绦虫原头蚴cDNA为模板扩增获得eg14-3-3ζ基因片段，eg14-3-3ζ基因片段与载体连接转化获得重组质粒，重组质粒转化大肠杆菌经诱导表达获得的重组蛋白；所述eg14-3-3ζ基因片段如SEQIDNO.2所示；所述扩增采用的引物对序列如SEQIDNO.3、4所示；所述试剂盒为间接ELISA检测试剂盒；所述重组细粒棘球绦虫14-3-3ζ蛋白为如SEQIDNO.1所示的蛋白；所述重组细粒棘球绦虫14-3-3ζ蛋白的编码基因序列如SEQIDNO.2所示；所述试剂盒的抗原包被浓度为2.0μgmL，血清稀释度为1:50；所述试剂盒的血清作用时间为37℃1h；所述试剂盒的酶标二抗工作浓度为1:4000；所述试剂盒的酶标二抗作用时间为37℃1h。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心) 一种检测犬、羊等家畜细粒棘球绦虫感染的ELISA试剂盒
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