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一种带His标签的重组人透明质酸酶的分离纯化方法 

申请/专利权人:上海晟国医药发展有限公司

申请日:2023-12-28

公开(公告)日:2024-05-07

公开(公告)号:CN117987393A

主分类号:C12N9/26

分类号:C12N9/26;C07K19/00

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.05.24#实质审查的生效;2024.05.07#公开

摘要:本发明公开了一种带His标签的重组人透明质酸酶的分离纯化方法,该分离纯化方法包括:将含有带His标签的重组人透明质酸酶的细胞上清液进行亲和层析并收集洗脱峰,所述带His标签的重组人透明质酸酶包括重组人透明质酸酶蛋白、与重组人透明质酸酶蛋白的一端依次连接的sumo蛋白酶酶切位点、His6标签;对收集的洗脱峰对应的洗脱液进行酶切,得酶切液;对酶切液进行亲和层析并收集流穿峰;对收集的流穿峰进行阳离子交换层析收集洗脱峰。本发明的分离纯化方法可操作性强、重复性好,可获得高纯度、高活性的重组人透明质酸酶蛋白。

主权项:1.一种带His标签的重组人透明质酸酶的分离纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:1将含有带His标签的重组人透明质酸酶的细胞上清液进行亲和层析并收集洗脱峰,所述带His标签的重组人透明质酸酶包括重组人透明质酸酶蛋白、与重组人透明质酸酶蛋白的一端依次连接的sumo蛋白酶酶切位点、His6标签;2对步骤1收集的洗脱峰进行酶切,得酶切液;3对酶切液进行亲和层析并收集流穿峰;4对步骤3收集的流穿峰进行阳离子交换层析并收集洗脱峰。

全文数据:

权利要求:

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