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【发明公布】获得小鼠肺组织中神经嵴源细胞的方法及应用_杭州医学院_202410121061.7 

申请/专利权人:杭州医学院

申请日:2024-01-29

公开(公告)日:2024-05-14

公开(公告)号:CN118028234A

主分类号:C12N5/0797

分类号:C12N5/0797;C12N5/10;G01N21/64

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.05.31#实质审查的生效;2024.05.14#公开

摘要:本发明涉及细胞分离培养技术领域,尤其涉及一种获得小鼠肺组织中神经嵴源细胞的方法及应用。本发明提供了一种获得小鼠肺组织中神经嵴源细胞的方法,该方法以小鼠肺组织作为分离原料,经消化和原代培养步骤,得到高纯度神经嵴源细胞。获取的神经嵴源细胞具有较强的增殖能力,体外持续培养数十代后仍具有增殖能力。另外,本发明还利用流式分选的方法分离EGFP标记的神经嵴源细胞,分选后细胞纯度最高,更适合进行EGFP阳性神经嵴源细胞的分选及后续培养。

主权项:1.获得小鼠肺组织中神经嵴源细胞的方法,其特征在于,将小鼠肺组织剪切后置于细胞消化液中消化,得到细胞群;然后使用原代培养基对所述细胞群进行培养;所述细胞消化液包含2-3mgmL的胶原酶I和0.5-1.5mgmL的DNaseI;所述原代培养基以DMEM培养基作为基础培养基,添加10-25vol%的胎牛血清、终浓度80-120IUL的青霉素-链霉素、0.8-1.2vol%的浓度为90-110mM的丙酮酸钠溶液、0.8-1.2vol%的浓度为190-210mM的L-谷胺酰胺溶液、0.8-1.2vol%的浓度为8-12mM的MEM非必须氨基酸溶液和0.08-0.12vol%的浓度为50-60mM的β-巯基乙醇溶液;使用原代培养基对所述细胞群进行培养后,还包括使用流式细胞分选仪对培养获得的细胞进行分选的步骤;所述流式细胞分选仪的激发波长具有激发EGFP绿色荧光和激发Mtomato红色荧光的能力。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 杭州医学院 获得小鼠肺组织中神经嵴源细胞的方法及应用

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