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靶向敲除人核糖体蛋白L26基因的sgRNA及其应用 

申请/专利权人:常州大学

申请日:2024-02-05

公开(公告)日:2024-05-28

公开(公告)号:CN118086292A

主分类号:C12N15/113

分类号:C12N15/113;C12N9/22;C12N15/85;C12N5/10

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.06.14#实质审查的生效;2024.05.28#公开

摘要:本发明公开了靶向敲除人核糖体蛋白L26基因的sgRNA及其应用,属于基因编辑与修饰技术领域。在NCBI网站上检索了人的核糖体蛋白L26RPL26基因的CDS序列,然后根据sgRNA的设计原则,寻找CDS上的PAM‑NGG‑位点,并在其CDS区近5’端设计了两条长度为20bp的sgRNA。接下来,分别构建了单个sgRNA表达质粒,并将载体转染到人胚肾细胞。经过Sanger测序鉴定和T7验证,证实这两个质粒转染HEK293T细胞后均能引导Cas9蛋白切割靶基因使RPL26基因组发生移码突变,实现RPL26基因靶向敲除。

主权项:1.一种用于靶向敲除人核糖体蛋白L26基因的sgRNA,其特征在于,所述sgRNA为sgRNA1或sgRNA2,所述sgRNA1、sgRNA2的核苷酸序列如下:sgRNA1:5’-ACATAATCTTCCTTCGAATG-3’sgRNA2:5’-ACCGAAGCAAGAATCGCAAA-3’。

全文数据:

权利要求:

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