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申请/专利权人：福建师范大学

摘要：本发明涉及体液样本的分析检测领域，具体涉及一种HAPAg复合SERS增强基底的体液拉曼光谱检测方法。将银纳米粒子沉积在HAP上制备成复合SERS增强基底，通过SERS技术进行检测不同人群中采集的体液样本，实验证明HAPAg复合SERS增强基底可以有效检测体液样本。相比于传统检测方法,该检测方法避免了繁琐的样品前处理过程，具有快速、操作简单、成本低廉等特点，极大缩短了时间，提高了检测效率。

主权项：1.一种羟基磷灰石Ag复合SERS增强基底的体液拉曼光谱检测方法，其特征在于，将银纳米粒子沉积在羟基磷灰石上，再将不同人群中采集的体液样本直接滴加在上面，通过表面增强拉曼光谱SERS技术检测获取体液样本的SERS光谱图来有效检测体液样本；该方法包括如下步骤：1羟基磷灰石的制备采用水热法制备羟基磷灰石纳米颗粒，具体为：称取1-1.5gCaNO32•4H2O溶解于25-50mL的超纯水中，搅拌10-30min；称取1-1.3g的Na2HPO4•12H2O溶解于25-50mL的超纯水中；将Na2HPO4•12H2O溶液按一分钟滴加一滴的速度滴加到CaNO32•4H2O溶液中，在滴加的过程中，溶液由澄清逐渐变浑浊，随后用稀硝酸滴定溶液的pH值为2.5，溶液变澄清；接着在溶液中加入5-10mg的环己烷六羧酸H6L和1-3g的CONH22持续搅拌20-50min；进行水热反应，待反应结束后自然冷却至室温；离心收集产物，用乙醇和超纯水清洗，最后在真空干燥箱中干燥64-72h，然后研磨成羟基磷灰石纳米颗粒粉末；所述水热反应具体为100-150℃，反应3-5h；2羟基磷灰石Ag的制备称取3-7mg干燥好的羟基磷灰石粉末加入到装有15mL,20mM硝酸银的乙醇溶液，超声25-50min使其均匀分散得到悬浊液；然后将上述悬浊液置于水浴加热的环境中，向其中加入15-30µL的正丁胺，磁力搅拌30-50min；待反应结束后，将反应产物离心分离，水洗两次，无水乙醇洗两次，最后真空干燥放于得到羟基磷灰石Ag纳米颗粒；将制备好的羟基磷灰石Ag涂抹到铝片上作为SERS增强基底；所述水浴加热温度为30-50℃；所述真空干燥具体为30-50℃真空干燥24-48h；3羟基磷灰石Ag的SERS检测分别用不同人群的体液样本进行SERS测量，在SERS实验中，将不同体液样本滴加到羟基磷灰石Ag复合SERS增强基底上；在空气中自然风干，用于SERS测量；在样本的五个不同位置检测由所述不同的体液样本与羟基磷灰石Ag复合SERS增强基底产生的SERS信号；4得到不同体液样本的SERS特征峰不同体液样本重复步骤（1）到（3）的操作建立不同体液样本表面增强拉曼光谱数据库，采用扣荧光的方法对所述表面增强拉曼光谱数据库进行后处理分析，建立表面增强拉曼光谱分析模型，获得不同体液样本对应的表面增强拉曼光谱的特征峰。

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