申请/专利权人:内蒙古科技大学;中牧实业股份有限公司
申请日:2024-01-26
公开(公告)日:2024-05-31
公开(公告)号:CN118112129A
主分类号:G01N30/02
分类号:G01N30/02;G01N30/06;G01N30/36;G01N30/54;G01N30/74
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.06.18#实质审查的生效;2024.05.31#公开
摘要:本发明公开了一种水体中泰乐菌素和泰万菌素的检测方法,具体包括以下步骤:配制标准溶液;沉淀待测水样中杂蛋白;通过固相萃取法将水样制成供试品溶液;采用高效液相色谱法检测供试品溶液,计算泰乐菌素和泰万菌素含量。高效液相色谱条件为Agilent5TC‑C182色谱柱,DAD检测器,流动相为乙腈和0.1%甲酸水溶液,采用梯度洗脱,外标法定量。本发明提供的方法分离度、精密度、回收率均很高,重现性好且检测结果准确,能一次性同时检测泰乐菌素和泰万菌素,为水质评估提供了检测方法,也为泰乐菌素和泰万菌素在不同体系下的检测提供了思路,具有良好的应用前景。
主权项:1.一种水体中泰乐菌素和泰万菌素的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:S1.配制标准溶液:分别精密称取泰乐菌素和泰万菌素标准品各10mg,以液相色谱初始流动相为溶剂溶解并定容到100mL容量瓶中,配置成质量浓度为100mgL的混合标准工作液,于4℃冷藏备用;S2.沉淀待测水样中杂蛋白:量取待测水样置于容器中,调节pH至6~8后,加入一定体积硫酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液作为蛋白质沉淀剂,Na2EDTA溶液作为稳定剂,充分混匀并静置后,离心除去废水中沉淀后的蛋白质和不溶性杂质,取上清液;S3.通过固相萃取法将水样制成供试品溶液:使用C18萃取柱,依次用6mL甲醇和6mL去离子水活化萃取柱,取上清液作为上样液,通过固相萃取柱进行富集纯化;上样结束后用甲醇冲洗萃取柱,除去干扰物,冲洗后弃去淋洗液,开泵抽干萃取柱中全部残留液;用甲醇进行洗脱,将洗脱液收集到试管中,氮吹仪吹干洗脱液,复溶至液相色谱梯度洗脱初始流动相中,超声振荡使流动相与浓缩后的洗脱液充分互溶,经过0.22μm尼龙滤膜过滤后即为供试品溶液;S4.采用高效液相色谱检测供试品溶液,计算泰乐菌素和泰万菌素含量。
全文数据:
权利要求:
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