申请/专利权人：中农种源(深圳)科技有限公司

申请日：2023-07-18

公开（公告）日：2024-06-04

公开（公告）号：CN116855539B

主分类号：C12N15/85

分类号：C12N15/85;A01K67/0276;C12N15/57;C12N15/12

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.06.04#授权;2023.10.27#实质审查的生效;2023.10.10#公开

摘要：本发明提供了一种同时敲除CD163、pAPN、MSTN基因抗病和品质改良猪培育方法，属于动物育种技术领域。本发明通过基因编辑技术对猪CD163、pAPN和MSTN基因定点敲除，鉴于MSTN基因编辑后的引进商业猪种后代易出现后肢无力的畸形表型，将MSTN基因编辑引进商业猪种和MSTN基因编辑地方猪进行杂交，获得的MSTN基因编辑二元杂交猪突出廋肉型商品猪种和脂肪型地方猪种的品种特性，并保留MSTN基因编辑对猪种廋肉率和肉质改良的优势表型，将其与CD163和pAPN双基因编辑猪杂交，实现3个基因位点快速聚集。本发明成功育成抗蓝耳病、传染性胃肠炎、猪德尔塔冠状病毒病，并且瘦肉率高的优质猪新品系。

主权项：1.一种同时敲除CD163、pAPN、MSTN基因抗病和品质改良猪培育方法，其特征在于，包括以下步骤：用基因编辑方法分别制备F0代MSTN基因编辑大白猪、F0代MSTN基因编辑梅山猪和F0代CD163、pAPN双基因编辑大白猪；以所述F0代MSTN基因编辑大白猪为父本，以F0代MSTN基因编辑梅山猪为母本进行交配，得到F1代MSTN基因编辑大梅猪；将所述F0代CD163、pAPN双基因编辑大白猪为父本，以所述F1代MSTN基因编辑大梅猪为母本进行交配，横交固定，得到同时敲除CD163、pAPN、MSTN的基因编辑猪；所述F0代CD163、pAPN双基因编辑大白猪的制备方法包括采用CRISPRCas9技术制备CD163、pAPN双基因编辑大白猪细胞，利用体细胞克隆生产F0代CD163、pAPN双基因编辑大白猪；所述CD163基因的特异性gRNA如SEQIDNO:1所示；所述pAPN基因的特异性gRNA如SEQIDNO:2所示；所述F0代MSTN基因编辑大白猪、F0代MSTN基因编辑梅山猪的制备方法为利用TALEN技术分别制备MSTN基因编辑大白猪和MSTN基因编辑梅山猪细胞，利用体细胞克隆生产F0代MSTN基因编辑大白猪和F0代MSTN基因编辑梅山猪；所述MSTN基因的第三外显子特异性识别序列如SEQIDNO:3和SEQIDNO:4所示。

全文数据：

权利要求：

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