申请/专利权人:广西壮族自治区人民医院
申请日:2024-03-29
公开(公告)日:2024-06-07
公开(公告)号:CN118147185A
主分类号:C12N15/70
分类号:C12N15/70;C12N15/12;C07K14/47;C07K1/14;C07K1/34;C12R1/19
优先权:
专利状态码:在审-公开
法律状态:2024.06.07#公开
摘要:本发明涉及一种ADAMTSL5原核表达载体的构建及其表达纯化方法。该构建方法包括:1利用PCR反应扩增编码ADAMTSL5的基因序列;2以NdeI和HindIII为酶切位点,将PCR产物连接至质粒载体上,获得重组表达载体。该表达纯化方法包括:1将所述重组表达载体转化至大肠杆菌中培养,诱导,收集菌体,采用超声波破碎后,离心得到含有蛋白的包涵体;2从上述包涵体中分离纯化蛋白。本发明通过ADAMTSL5的原核表达载体的构建及蛋白的纯化,能够从原核中提取出纯化的蛋白,填补ADAMTSL5的原核表达技术的空白,可为后续ADAMTSL5的应用提供原料。
主权项:1.一种ADAMTSL5原核表达载体的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:1以F1和R1为引物,利用PCR反应扩增编码ADAMTSL5的基因序列,引物序列如下:F1:5’-TGTATACCCGTGACACTGGT-3’;R1:5’-GATCCCGCGAAATTAATACG-3’;2以NdeI和HindIII为酶切位点,将PCR产物连接至质粒载体上,获得重组表达载体。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 广西壮族自治区人民医院 一种ADAMTSL5原核表达载体的构建及其表达纯化方法
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