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申请/专利权人：山东伯桢生物科技有限公司

摘要：本发明公开了体外构建类器官的方法及类器官，涉及生物学领域。所述体外构建类器官的方法包括：将细胞与基质胶混合，得到包含细胞的基质胶；将所述包含细胞的基质胶与中空管道外表面进行接触处理，所述包含细胞的基质胶在所述中空管道外表面上形成基质胶凝固物；将所述中空管道内注入类器官培养基，得到3D细胞培养环境，所述中空管道具有微孔结构，所述微孔结构适于所述类器官培养基流出和或流入所述中空管道；对所述细胞进行培养，得到类器官。本发明的方法类器官生长速率快，培养周期短，得到的类器官体积突破厘米级，成熟度高，大小均一，仿生能力强，应用价值高。

主权项：1.一种肾脏类器官的体外构建类器官的方法，其特征在于，包括：将细胞与基质胶混合，得到包含细胞的基质胶；将所述包含细胞的基质胶与中空管道外表面进行接触处理，所述包含细胞的基质胶在所述中空管道外表面上形成基质胶凝固物；将所述中空管道内注入类器官培养基，得到3D细胞培养环境，所述中空管道具有微孔结构，所述微孔结构适于所述类器官培养基流出和或流入所述中空管道；对所述细胞进行培养，得到类器官；其中，所述方法通过生物反应器实现，所述生物反应器包括：框架、反应腔体、输入管道、输出管道和生物芯片；生物芯片设置于反应腔体内，反应腔体设置于框架内，输入管道包括：输入管道第一端和输入管道第二端，输入管道第一端与液体储存装置相连，输入管道第二端与生物芯片的中空管道内连通，输出管道包括：输出管道第一端、输出管道第二端和输出管道第三端，输出管道第一端与液体收集装置相连，输出管道第二端与生物芯片的中空管道内连通，输出管道第三端与反应腔体连通；所述生物芯片包括：所述中空管道、支撑结构和基座，所述中空管道通过所述支撑结构固定于所述基座上；所述微孔结构的孔径为5～20μm；所述中空管道的横截面上形成2～32个所述微孔结构；所述中空管道沿轴向方向每隔100～500μm形成1个所述微孔结构；所述微孔结构在所述中空管道轴向上的投影为扇形；所述微孔结构的开口背离中空管道的内壁；所述类器官培养基包括：DMEMF12培养基、HEPES缓冲液、L-谷氨酰胺、青霉素、链霉素、烟酰胺、N-乙酰半胱氨酸、SB2021、Y27632、A8301、R-spondin蛋白、EGF、血清替代物、FGF10和Wnt-3a蛋白；以所述DMEMF12培养基总体积计，所述类器官培养基含有如下浓度的组分：0.5～2体积%的HEPES缓冲液，0.5～1.5体积%的L-谷氨酰胺，50～200UmL的青霉素，0.05～0.2mgmL的链霉素，5～10mM的烟酰胺，1～1.5mM的N-乙酰半胱氨酸，0.1～1μM的SB2021，5～10μM的Y27632，0.1～1μM的A8301，250～1000ngmL的R-spondin蛋白，50～100ngmL的EGF，1～5体积%的血清替代物，0.1～1μgmL的FGF10，25～100ngmL的Wnt-3a蛋白。

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