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申请/专利权人：河北工业大学

摘要：本发明公开了一种金莲花的无菌快繁方法和金莲花的种植方法，涉及金莲花培育技术领域。该无菌快繁方法包括将清洗后的金莲花种子采用酒精和次氯酸钠共同消毒；随后接种萌发获得金莲花幼苗；其中，萌发培养基是通过先向基础培养基中加入头孢霉素与混合液，再加入活性炭和维生素C获得的；将金莲花幼苗培育、炼苗和移栽。本申请经上述处理可以有效改善金莲花消毒效果欠佳，染菌和褐化严重的问题，有利于提升金莲花组织培养的成苗率和增殖率。同时本发明提供的方法，种子5‑6天开始萌发，种子无菌萌发率80.67％，繁殖周期60天，增殖系数为4.34，移栽成活率达90％以上，极大地提高了金莲花的繁殖数量与生长速率。

主权项：1.一种金莲花的无菌快繁方法，其特征在于，其包括：将清洗后的金莲花种子采用75%的酒精消毒1-2min，再采用4-6%的次氯酸钠消毒20-30min获得无菌种子；将所述无菌种子接种至萌发培养基中进行萌发获得金莲花萌发苗；其中，所述萌发培养基是通过先向基础培养基中加入20-30mgL的头孢霉素以及20-40mgL混合液，再加入40-60mgL活性炭和80-120mgL维生素C获得的，其中，所述混合液为65-75%代森锰锌和70-80%百菌清按照1:1的比例混合而成的；所述基础培养基是以MS培养基为基础+2mgL6-BA+0.1mgLNAA，将所述MS培养基中蔗糖替换为白糖23-27mgL，并降低琼脂用量至5-6gL获得的；将所述金莲花萌发苗人工培育获得组培苗，对所述组培苗进行炼苗和移栽；将所述组培苗进行炼苗和移栽包括：将组培瓶中的所述组培苗提前5d置放于大棚炼苗，基质为草炭土和珍珠岩的混合物，所述混合物中草炭土：珍珠岩的体积比为3：1，在灭菌锅中进行高温灭菌，调节pH值至5.8，然后从组培瓶中将所述组培苗取出，将根上的培养基用水清洗干净，用1%多菌灵浸泡10min，然后栽在穴盘中；将所述金莲花萌发苗人工培育获得组培苗包括：将所述金莲花萌发苗移栽至已灭菌的萌发培养基中继续进行人工萌发培养，获得金莲花无菌苗，所述人工萌发培养为先暗培养七天，后光照12h黑暗12h，光照强度1300-1700Lux，萌发培养的时间为28-30d；将所述金莲花无菌苗的茎段作为外植体，将所述外植体插入至增殖与继代培养基中增殖继代培养，所述增殖与继代培养基的组分为MS培养基+2mgL6-BA+0.3-0.5mgLNAA+40-60mgL活性炭+80-120mgL维生素C，所述增殖继代培养的时间为58-62d；获得丛生芽茎段；将所述丛生芽茎段接种至生根培养基中培养，所述生根培养基是12MS培养基+0.5mgLNAA+40-60mgL活性炭+80-120mgL维生素C，所述生根培养的时间为28-32d，获得组培苗。

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