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【发明公布】基于滚环扩增的SERS生物传感器及其在脂多糖检测中的应用_安徽工业大学_202410432923.8 

申请/专利权人:安徽工业大学

申请日:2024-04-11

公开(公告)日:2024-06-11

公开(公告)号:CN118169103A

主分类号:G01N21/65

分类号:G01N21/65;C12Q1/6844;G01N33/53;C12N15/115

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.06.28#实质审查的生效;2024.06.11#公开

摘要:本发明提供了一种基于滚环扩增的SERS生物传感器并基于此用于脂多糖的检测。本发明中,随着LPS含量的增多,释放探针的含量也逐渐增加,触发更多的滚环扩增反应,产生更多的富胞嘧啶序列。AgNTs表面的一个Ag+能够与富含C的DNA中的多个胞嘧啶结合,形成C‑Ag+‑C错配,诱导DNA弯曲。由于结构自由度的下降,弯曲的DNA会产生一个应力,迫使结合的Ag+从AgNTs中释放出来,从而启动DNA定向蚀刻。通过尖端热点的减少,SERS信号也逐渐下降,从而实现对LPS含量的检测。该生物传感平台具有从1fgmL到1ngmL的宽检测范围,检测限低至0.12868fgmL。

主权项:1.一种基于滚环扩增的SERS生物传感器,采用包括下述步骤的方法制备得到:1制备银纳米三角片AgNTs并修饰拉曼染料;2制备圆形模板:利用Padlock链和Primer链在T4连接酶、核酸外切酶EXOI和EXOIII作用下制备圆形模板,其中,Padlock链序列如下:5’-AAAGGGTCTATGGGCTTGGACCCGATGGTGGGAATTAGGGGATATAAAGGGTCGGGGTT-3’;Primer链序列如下:5’-TAGACCCTTTAACCCCGACC-3’;3电极处理:包括电极预处理和电极修饰;4滚环扩增:向电极滴加脂多糖释放链N、圆形模板、Phi29酶、dNTP和Mg2+,进行滚环扩增反应;所述脂多糖释放链N是先将脂多糖适配体LBA与触发链N孵育得到LBA-N结合体,然后再将脂多糖与LBA-N结合体共同孵育得到;脂多糖适配体LBA序列如下:5’-CTTCTGCCCGCCTCCTTCCTAGCCGGATCGCGCTGGCCAGATGATATAAAGGGTCAGCCCCCCAGGAGACGAGATAGGCGGACACT-3’;触发链N序列如下:5’-CTGACCCTTTATATCATCTGG-3’;5刻蚀:加入步骤1修饰拉曼染料的银纳米三角片AgNTs,进行刻蚀。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 安徽工业大学 基于滚环扩增的SERS生物传感器及其在脂多糖检测中的应用

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