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申请/专利权人：中国科学院大连化学物理研究所
申请日：2022-12-10
公开（公告）日：2024-06-11
公开（公告）号：CN118165064A
主分类号：C07K1/14
分类号：C07K1/14;C07K1/30
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.06.28#实质审查的生效;2024.06.11#公开
摘要：本发明涉及一种用于蛋白质聚集体分离纯化的方法。本发明公开了一种从组织和细胞中分离纯化出蛋白质聚集体的方法。首先将组织和细胞使用聚集体靶向荧光分子染色12‑24小时，通过27G针头反复挤压形成细胞裂解液。然后将蔗糖溶于含有GPBS缓冲液中，采用层铺法配制30％～80％的蔗糖密度梯度离心液。将细胞裂解液注入蔗糖密度梯度离心液的最上层，离心，按200‑500μL使用移液枪从上往下逐级吸取离心液，将离心液分为若干级分。采用荧光分光光度计，测定每一级分荧光发射强度，从而确定蛋白质聚集体级分。最后，通过丙酮沉淀的方式从蔗糖密度梯度离心液中分离出蛋白质聚集体。本发明适用于分离纯化组织和细胞中的蛋白质聚集体，重复性好，回收率高，分离纯度高，操作简便。
主权项：1.一种用于蛋白质聚集体分离纯化的方法，其特征在于，包括以下步骤：1将组织或细胞样品使用聚集体靶向荧光分子染色12-24小时；2将步骤1染色后的组织或细胞样品进行预处理，并将细胞裂解形成细胞裂解液；3配制成不同质量浓度的蔗糖溶液；浓度范围为30％～80％并将蔗糖溶液按照浓度由高到低逐层注入离心管中，形成蔗糖密度梯度离心液；4将细胞裂解液注入蔗糖密度梯度离心液的最上层，离心，分级；5通过测定荧光发射的方式，确定蛋白质聚集体所在级分；6通过丙酮沉淀的方式从蛋白质聚集体所在级分中分离出蛋白质聚集体。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国科学院大连化学物理研究所 一种用于蛋白质聚集体分离纯化的方法
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