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申请/专利权人：中国科学院大连化学物理研究所
摘要：本发明涉及一种新型的细胞表面蛋白质组原位分析方法。在该方法中，将主体基团修饰到基质载体上，制备富集分离材料。将客体基团与标记基团连接，制备双功能客体标记探针分子。将探针与细胞共孵育，利用探针的不透膜性原位共价标记细胞表面蛋白，进行细胞全蛋白质的提取，随后将蛋白质混合物与固载有主体分子的富集材料共孵育，随后对富集到的蛋白进行酶解处理；结合液质联用技术和定量蛋白质组方法，对细胞表面蛋白质组进行原位分析。这一方法对于解析细胞间通讯、离子和其他分子的运输以及信号级联的传递，理解疾病、免疫、耐药以及细胞功能分化等涉及的通路，寻找新的疾病标志物以及药物开发中的新作用靶点具有重要意义。
主权项：1.一种基于主客体相互作用和无标定量的细胞表面蛋白质组的原位分析方法，其特征在于：包括以下步骤：1将主体基团修饰到基质载体上，制备特异性识别客体基团的主体富集分离材料；2将客体基团与标记基团连接，制备具有不可透膜且可富集的双功能客体标记探针分子；3将制备的客体标记探针分子与细胞共孵育，探针在细胞表面原位共价标记质膜蛋白、细胞表面蛋白；4将步骤3中的细胞破碎，提取细胞中的蛋白质混合物，将蛋白质混合物与步骤1制备的主体富集分离材料共孵育，利用主客体间的高亲和力相互作用从异质蛋白混合物中选择性捕获被客体标记探针标记的蛋白质；5对步骤4中富集到的蛋白质进行处理，收集肽段样品；6结合液质联用技术和无标定量，对步骤5中的肽段样品进行原位定量分析。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国科学院大连化学物理研究所 基于主客体相互作用和无标定量的细胞表面蛋白质组原位分析方法
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