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一种突触囊泡的提取方法 

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申请/专利权人:大连理工大学;烟台新药创制山东省实验室

摘要:本发明提供一种突触囊泡的提取方法,包括如下步骤:步骤1:用均质缓冲液匀浆鼠脑;步骤2:第一离心,收集第一上清液;步骤3:第二离心,收集第二上清液和沉淀;步骤4:向沉淀中加入ddH2O,匀浆;步骤5:进行第三离心,收集第三上清液,得到上清液;步骤6:收集第二和第三上清液进行第四离心,收集第四上清液;步骤7:用Optiprep密度梯度离心法对第四上清液进行纯化;步骤8:选取囊泡含量最高的一层,过柱洗脱。通过该提取方法,可以高效地从离体哺乳动物脑中提取突触囊泡样品,该突触囊泡在蛋白中的含量高,在25%以上,甚至30%以上,突触囊泡纯度高。本发明还提供了上述提取方法提取的突触囊泡。

主权项:1.一种突触囊泡的提取方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1:用均质缓冲液,匀浆鼠脑;步骤2:第一离心,收集第一上清液;步骤3:对步骤2得到的第一上清液进行第二离心,收集第二上清液和沉淀;步骤4:向步骤3得到的沉淀中加入ddH2O,匀浆;步骤5:对步骤4得到的溶液进行第三离心,收集第三上清液,得到上清液;步骤6:对步骤5得到的上清液进行第四离心,收集第四上清液;步骤7:用Optiprep密度梯度离心法对步骤6得到的第四上清液进行纯化;步骤8:选取囊泡含量最高的一层,过柱洗脱,色谱柱填料为Controlledporeglass-BETspecificsurfacearea。

全文数据:

权利要求:

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