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申请/专利权人：英国研究与创新署
申请日：2022-11-03
公开（公告）日：2024-06-14
公开（公告）号：CN118202056A
主分类号：C12N15/70
分类号：C12N15/70
优先权：["20211103 GB 2115820.9"]
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.14#公开
摘要：在一个方面，本发明涉及将目标序列引入靶核酸中的方法。本发明还涉及组装核酸序列的方法，所述方法包括对将目标序列引入靶核酸的方法进行迭代，以及组装编码更大量异源核酸的复制子。
主权项：1.一种将目标序列引入靶核酸的方法，所述方法包括a提供宿主细胞所述宿主细胞包含附加型复制子，所述附加型复制子包含骨架序列和供体核酸序列，其中所述供体核酸序列依次包含：5'-同源重组序列1-目标序列-同源重组序列2-3'，其中所述骨架序列包含位置邻近同源重组序列1的第一切除位点和位置邻近同源重组序列2的第二切除位点，所述宿主细胞还包含靶核酸；b提供能够支持所述宿主细胞中核酸重组的辅助蛋白；c提供RNA指导的DNA核酸内切酶；d提供包含对第一切除位点特异的序列的第一RNA分子和包含对第二切除位点特异的序列的第二RNA分子，其中所述第一和第二RNA分子有助于在切除过程中引导所述RNA指导的DNA内切核酸酶；e通过所述RNA指导的DNA核酸内切酶诱导所述供体核酸序列的切除；和f进行孵育，以允许切除的供体核酸和所述靶核酸之间的重组。
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