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申请/专利权人：四川大学
申请日：2024-03-29
公开（公告）日：2024-06-14
公开（公告）号：CN117965429B
主分类号：C12N5/071
分类号：C12N5/071;A61K47/46;A61K31/7088;A61K31/12;A61K9/127;A61P19/02;A61P29/00
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.14#授权;2024.05.21#实质审查的生效;2024.05.03#公开
摘要：本发明涉及生物材料技术领域，公开了一种负载姜黄素和miR140的靶向杂交外泌体、制备方法及应用，包括以下步骤：步骤1：获取可稳定表达软骨细胞靶向肽的细胞株；步骤2：加入miR‑140‑5pagomir共培养，分离提取得到负载miR‑140‑5p的外泌体；步骤3：大豆卵磷脂和胆固醇溶液中加入姜黄素溶液，得到脂质体缓冲液；根据脂质体缓冲液得到负载姜黄素的脂质体溶液；步骤4：将步骤2得到的外泌体和步骤3得到的溶液通过冷冻循环法得到所需靶向杂交外泌体；本发明杂交外泌体同时负载姜黄素和miR140，姜黄素和miR140协同抑制NF‑κB通路的激活，增强抗炎效果，并可显著降低姜黄素的细胞毒性。
主权项：1.一种负载姜黄素和miR140的靶向杂交外泌体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：获取可稳定表达软骨细胞靶向肽的细胞株；步骤2：步骤1得到的细胞株培养后，加入miR-140-5pagomir共培养，分离提取得到负载miR-140-5p的外泌体；步骤3：大豆卵磷脂和胆固醇溶液中加入姜黄素溶液，旋蒸后加缓冲液超声，得到脂质体缓冲液；脂质体缓冲液中加入蔗糖，冻干后水合、过滤即可得到负载姜黄素的脂质体溶液；大豆卵磷脂和胆固醇的质量比为1～10:1，姜黄素与胆固醇的质量比为1～2:1000～25；步骤4：将步骤2得到的负载miR-140-5p的外泌体和步骤3得到的负载姜黄素的脂质体溶液通过冷冻循环法制备得到所需靶向杂交外泌体；负载miR-140-5p的外泌体和负载姜黄素的脂质体的颗粒数比值为1～10:10～1。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 四川大学 一种负载姜黄素和miR140的靶向杂交外泌体、制备方法及应用
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