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一种絮凝蛋白的提取方法及应用 

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申请/专利权人:上海交通大学

摘要:本发明公开了一种絮凝蛋白的提取方法及其应用,通过培养含有絮凝蛋白的菌株、细胞破碎、释放目标蛋白、固定蛋白法提取絮凝蛋白以及干燥富集后获得絮凝蛋白成品。本发明具有提取工艺简单、可操作性强、提取条件温和、蛋白纯度高等优势。提取的絮凝蛋白可以用作外源添加的絮凝剂以实现细胞的收集,也可以用于糖类的特异性分离纯化以及食品行业与护肤品行业。

主权项:1.一种絮凝蛋白的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:S1培养含有絮凝蛋白的菌株;S2收集菌株,破碎细胞后离心,得到破碎上清液和沉淀;S3向S2获得的沉淀中加入GPI切割酶进行酶解反应,离心后取上清液;S4在部分S1得到的菌株中,加入解絮凝剂进行解絮凝得到的新鲜完整的絮凝细胞为固定细胞;将所述固定细胞加入S2得到的破碎上清液和S3得到的上清液中,再加入含有Ca2+的絮凝剂孵育后,离心收集携带絮凝蛋白的固定细胞,加入螯合Ca2+的金属螯合剂分离絮凝蛋白与细胞;所述解絮凝剂为GPI切割酶或者1M的EDTA;S5将S4中获得的絮凝蛋白溶液进行干燥,浓缩富集絮凝蛋白。

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权利要求:

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