申请/专利权人：中国农业大学

申请日：2023-04-14

公开（公告）日：2024-06-18

公开（公告）号：CN116539743B

主分类号：G01N30/02

分类号：G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/72;G01N30/86

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.06.18#授权;2023.08.22#实质审查的生效;2023.08.04#公开

摘要：本发明提供了一种检测槟榔中特异性N‑亚硝基化合物的方法，通过对样品进行必要的柱前衍生，利用超高效液相色谱质谱联用绘制工作曲线，定性定量检测槟榔中特异性N‑亚硝基化合物。该检测方法具有灵敏度高、分析时间短、定量准确的优点，可以应用于槟榔致癌性的研究，尤其适用于含N‑亚硝基去甲槟榔次碱、N‑亚硝基去甲槟榔碱、3‑甲基亚硝胺丙腈、3‑甲基亚硝胺丙醛和N‑亚硝基异丙酸的槟榔的致癌性研究。

主权项：1.一种检测槟榔中特异性N-亚硝基化合物的方法，其特征在于：所述N-亚硝基化合物为N-亚硝基去甲槟榔碱、N-亚硝基去甲槟榔次碱、N-亚硝基异丙酸、3-甲基亚硝胺丙腈和3-甲基亚硝胺丙醛；所述方法步骤如下：（1）样品前处理：将3-甲基亚硝胺丙醛进行柱前衍生，衍生方法如下：取含3-甲基亚硝胺丙醛的样品液或标准溶液，加入同等体积的2,4-二硝基苯肼反应溶液，充分混匀反应，静置；且3-甲基亚硝胺丙醛与2,4-二硝基苯肼反应的环境条件为黑暗环境、25℃，静置时间为1h；（2）制备标准工作曲线：用甲醇将标准品储备液分别稀释成五个浓度梯度的N-亚硝基去甲槟榔碱、N-亚硝基去甲槟榔次碱、3-甲基亚硝胺丙腈和N-亚硝基异丙酸混合标准溶液和3-甲基亚硝胺丙醛+2,4-二硝基苯肼标准溶液，再经0.22μm尼龙滤膜过滤；（3）采用LC-MSMS进行分析，统计各个浓度下各物质的峰面积，以标准溶液的浓度为横坐标，定量离子的色谱峰面积为纵坐标绘制标准工作曲线，得到线性回归方程和拟合优度R2；所述LC-MSMS检测条件如下：液相色谱条件：色谱柱：WatersAcquityUPLCHSST3色谱柱，2.1mm×100mm，1.7μm；流动相：A：乙腈，B：0.1vt.%甲酸水溶液；洗脱方式：梯度洗脱；洗脱程序：0.00~0.50min，5vt.%A；0.50~3.50min，5~95vt.%A；3.50~4.00min，95vt.%A；4.00~4.50min，95~5vt.%A；4.50~5.00min，5vt.%A；柱温：30℃；样品室温度：10℃；进样量：2μL；流速：0.3mLmin；质谱条件：质谱仪：三重四极杆质谱仪；离子源：电喷雾离子源；毛细管电压：1.50kV；脱溶剂气-氮气温度：350℃；脱溶剂气流量：1000Lh；雾化器压力：6.2bar；锥孔气流量：150Lh；扫描方式：多反应检测模式；质谱（MRM）参数： 。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国农业大学 一种检测槟榔中特异性N-亚硝基化合物的方法

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