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申请/专利权人：杭州力文所生物科技有限公司
申请日：2024-04-24
公开（公告）日：2024-06-21
公开（公告）号：CN118222555A
主分类号：C12N9/80
分类号：C12N9/80;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.21#公开
摘要：本发明公开了一种用于去糖基化的N‑糖酰胺酶F突变体及其重组基因，本发明通过Lésign平台对野生型N‑糖酰胺酶F进行序列改造。计算得到的突变体均表现出对人IgG或RNaseB非变性或辣根过氧化物酶的酶活改进特性。特别是，野生型PNGaseF对辣根过氧化物酶无酶切活性，PNGaseF突变体则均表现出对辣根过氧化物酶优异的酶切活性。尤其是，1.25μg的突变体pET28a‑TBT12、pET28a‑TBT15～pET28a‑TBT17，分别能切除1μg辣根过氧化物酶95％以上的糖基。因此，本发明突变后的N‑糖酰胺酶F的底物酶切范围更广，可以适用于更多糖蛋白的糖基检测中。
主权项：1.一种用于去糖基化的N-糖酰胺酶F突变体，其特征在于所述N-糖酰胺酶F突变体以SEQIDNO:1所述的N-糖酰胺酶F为母本，进行以下序列改造：1删除1～43位的氨基酸；2进行以下突变集进行突变：T72E+K84T+E137A+N150P；所述氨基酸位点参照如SEQIDNO：1所示的野生型N-糖酰胺酶F的氨基酸序列。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 杭州力文所生物科技有限公司 一种用于去糖基化的N-糖酰胺酶F突变体及其重组基因
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