申请/专利权人:斯坦德生物医药(江苏)有限公司
申请日:2024-04-30
公开(公告)日:2024-06-21
公开(公告)号:CN118222522A
主分类号:C12N7/02
分类号:C12N7/02;C12R1/93
优先权:
专利状态码:在审-公开
法律状态:2024.06.21#公开
摘要:本发明涉及纯化方法技术领域,具体涉及一种伪狂犬病毒的纯化方法,通过ST细胞培养收获的伪狂犬病毒通过离心过滤,然后用阴离子复合填料纯化,然后浓缩得到高纯度伪狂犬病毒液,本发明具有经济成本低、可大规模处理量、处理时间短、纯度高等优势。
主权项:1.一种伪狂犬病毒的纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:1ST细胞取经培养2-3天;2生弃去培养基,按MOI比例加入PRV病毒悬液,补加培养液至10ml;3在5%浓度二氧化碳培养箱中进行培养,显微镜下观察,见90%细胞出现病变即可终止培养;4收集培养上清离心10~30分钟除去细胞碎片,制得伪狂犬病毒粗提液;5将伪狂犬病毒粗提液通入填料柱;6采用1*PBS进行洗脱,收集流穿液收集体积为上样体积的1.1-1.2倍;7采用截留分子量为300K的过滤材料对收集的洗脱液进行超滤浓缩得到伪狂犬病毒浓缩液;8向浓缩液添加20%蔗糖溶液,使病毒液蔗糖浓度为5%。
全文数据:
权利要求:
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