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申请/专利权人：扬州大学
申请日：2024-04-25
公开（公告）日：2024-06-21
公开（公告）号：CN118222618A
主分类号：C12N15/83
分类号：C12N15/83;A01H5/00;A01H6/00
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.21#公开
摘要：本发明公开了一种TRV载体介导病毒诱导银杏基因沉默的方法。该方法采用含有特定目标基因片段的pTRV2载体与pTRV1载体分别转化到农杆菌感受态中，并将含有这两种载体的单克隆菌体混合，利用侵染液重悬得到混合侵染液，切除银杏播种苗上胚轴并浇灌菌液，实现对银杏目标基因的沉默。本发明建立的银杏的pTRV‑VIGS病毒诱导基因沉默的方法下调银杏内源的目标基因的相对表达量，具有简单快速、高通量、易于操作的优势，为以后开展银杏基因功能研究提供了一种新途径和技术支持。
主权项：1.一种TRV载体介导病毒诱导银杏基因沉默的方法，其特征在于，包括如下步骤：1将pTRV1载体和含有银杏特定目的基因片段的pTRV2载体分别转化到农杆菌感受态中，筛选得到含有pTRV1的农杆菌和含有pTRV2-目的基因的农杆菌；2将含有pTRV1的农杆菌和含有pTRV2-目的基因的农杆菌分别进行增殖培养得到含有pTRV1的农杆菌的单克隆菌体液和含有pTRV2-目的基因的农杆菌的单克隆菌体液；3将含有pTRV1的农杆菌的单克隆菌体液和含有pTRV2-目的基因的农杆菌的单克隆菌体液分别离心，利用重悬液分别重悬上述两含有pTRV1的农杆菌的单克隆菌体和含有pTRV2-目的基因的农杆菌的单克隆菌体，将含有pTRV1的农杆菌的单克隆菌体重悬液和含有pTRV2-目的基因的农杆菌的单克隆菌体重悬液混匀，静置，得到目的基因的侵染液；4将侵染液浇灌银杏进行侵染，实现对银杏特定目标基因的沉默。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 扬州大学 一种TRV载体介导病毒诱导银杏基因沉默的方法
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