申请/专利权人：广西壮族自治区药用植物园

申请日：2023-05-04

公开（公告）日：2024-06-21

公开（公告）号：CN116584379B

主分类号：A01H4/00

分类号：A01H4/00

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.06.21#授权;2023.09.01#实质审查的生效;2023.08.15#公开

摘要：本发明公开了一种化橘红组织培养快速繁殖方法，其包括步骤为：外植体的选取、消毒、诱导培养、增殖培养、壮苗培养、生根培养以及炼苗与移栽；其中，所述诱导培养为：将经过消毒的外植体接种到MS培养基中，在培养温度为24‑26℃，光照强度为1800‑2000lux，光照时间为10‑12小时天的条件下培养15‑21天，获得无菌的带芽茎段，其中MS培养基中还含有1.0‑1.5mgL的6‑BA、0.5‑1.5mgL的KT、4.5gL的琼脂和25gL蔗糖，培养基的pH值为5.5‑6.0。本发明繁殖效率高，发芽生根效果好，利于移栽推广应用。

主权项：1.化橘红组织培养快速繁殖方法，其特征在于，包括步骤为：外植体的选取、消毒、诱导培养、增殖培养、壮苗培养、生根培养、以及炼苗与移栽；其中，外植体的选择、消毒为：选取生长健壮，健康无虫害的化橘红带腋芽的枝条，剪成1～2cm带腋芽的小茎段，流水冲洗干净，然后摊开在吸水纸上，自然风干；将风干的小茎段用1%洗洁精水溶液浸泡5-10min，线状自来水冲洗10-15min，在接种室超净台上用经高压灭菌的无菌水润洗2次，然后用75%的酒精浸泡30-50s，再用添加了2-3滴吐温-20的150毫升0.1%升汞消毒6-8min，无菌水冲洗3-5次，最后摊开在消毒滤纸上以除去表面水分，得到无菌外植体；所述诱导培养为：将经过消毒的外植体接种到MS培养基中，在培养温度为24-26°C，光照强度为1800-2000lux，光照时间为10-12小时天的条件下培养15-21天，获得无菌的带芽茎段，其中MS培养基中还含有5-10gL的粉状鸡蛋壳、10-15gL的芦荟汁、1.0-1.5mgL的6-BA、0.5-1.5mgL的KT、4.5gL的琼脂和25gL蔗糖，培养基的pH值为5.5-6.0；增殖培养为：将所述诱导培养得到的无菌带芽茎段置于R3增殖培养基中，培养温度24-26°C，光照强度1800-2000lux，光照时间为10-12小时天的条件下培养20-30天得到丛生芽，其中R3增殖培养基中还含有0.5-1.5mgL的6-BA、0.2-1.0mgL的NAA、4.5gL的琼脂和25gL蔗糖，培养基的pH值为5.5-6.0；壮苗培养为：更换培养基对丛生芽进行培养15-21天，所述壮苗培养的培养基为MS培养基中还含有5-10gL的粉状鸡蛋壳、15-20gL的芦荟汁、1-4mgL的硝酸银、0.5-1.5gL的粉状活性炭、0.1-0.5mgL的6-BA、0.1-0.5mgL的NAA、4.5gL的琼脂和25gL蔗糖，培养基的pH值为5.5-6.0；生根培养为：更换培养基进行生根培养15-21天，所述生根培养的培养基为12MS培养基中还含有5-10gL的粉状鸡蛋壳、1-4mgL的硝酸银、0.1-0.5gL的粉状活性炭、1.0-2.5mgL的IBA和0.5-1.5mgL的NAA、4.5gL的琼脂和25gL蔗糖，培养基的pH值为5.5-6.0；炼苗与移栽具体为：将生根培养获得的带2-4cm根长的完整植株连同培养容器移出培养室，转入大棚，在温度为25-27℃，放置5-7天，然后打开容器盖子，在瓶中加入自来水，炼苗3-4天，取出，洗净根部培养基，移栽到由腐殖土和蛭石、椰糠混合组成的基质中，腐殖土：蛭石：椰糠的重量比为3：1：1；移栽后7-10天用塑料薄膜保湿，上面再覆盖一层报纸，保持光照强度的遮光率为60%-70%，空气湿度85%-90%，每天喷雾1次。

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权利要求：

百度查询： 广西壮族自治区药用植物园 化橘红组织培养快速繁殖方法

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