申请/专利权人：中国农业科学院棉花研究所

申请日：2024-04-10

公开（公告）日：2024-06-25

公开（公告）号：CN118240910A

主分类号：C12Q1/18

分类号：C12Q1/18;C12Q1/24;C12R1/77

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.06.25#公开

摘要：本发明公开了一种基因编辑的新品种小麦苗期抗赤霉病的室内鉴定方法，属于作物病原菌接种方法的技术领域。该方法包括：1病原物分离和鉴定；2接种体制备；3小麦材料的准备及播种；4接种方法；5小麦苗期赤霉病抗性鉴定；本发明在室内环境可控的条件下，能够对基因编辑的新品种小麦苗期进行赤霉病抗性鉴定，与田间抗病性鉴定方法相比，具有操作简单易行、表型直观可靠、鉴定周期短、结果精准可靠等优势，对基因编辑新品种小麦苗期赤霉病抗性鉴定及相关研究工作的开展具有重要意义。

主权项：1.一种基因编辑的新品种小麦苗期抗赤霉病的室内鉴定方法，其特征是，包括以下步骤：1病原物分离和鉴定：收集具有典型赤霉病病斑的小麦病理组织小麦穗轴、籽粒、颖等，用75％乙醇将表面进行消毒后，于马PDA培养基平板上进行培养，分离物经形态学鉴定后，通过分离物纯化及致病性测定，筛选致病力强的菌株，冷藏保存备用。2接种体制备：将PDA培养基平板活化培养的小麦赤霉病禾谷镰孢菌菌株接种于经高压灭菌的绿豆培养液中，25℃振荡培养3～5d后置于显微镜下观察，确认产生大量分生孢子后，配制成孢子悬浮液。3小麦材料的准备及播种：设置对基因编辑小麦、对应的受体材料及感病对照小麦品种；播种前，对基因编辑小麦、对应的受体材料及照感病小麦品种的种子进行清理，剔除瘪小、发芽、霉变及破损的种子。采用质量浓度为0.5％次氯酸钠溶液浸泡种子10s～20s，随后立即用清水冲洗多次，之后立即播种；在气候室或光照培养箱中培养，昼温20℃～25℃，夜温15℃～20℃，光周期为12h:12hL:D，相对湿度为60±10％。4接种方法：小麦出苗后10d时采用孢子悬浮液浇灌小麦根部的方式接种。每株幼苗在茎秆基部接种孢子悬浮液。接种后采用弥雾系统将接种幼苗置于近饱和的相对湿度下48h，之后在人工气候箱中培养，将小麦底部垫托盘，托盘内浇足水对小麦苗进行保湿。5小麦赤霉病苗期抗性鉴定：病情调查：接种后20d～25d待感病对照小麦充分发病后进行调查，分别调查并记载各供试材料的发病级别。病情级别分为0、1、2、3、4、5六个级别，根据病情指数评估受试小麦对赤霉病的抗性。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国农业科学院棉花研究所 一种基因编辑的新品种小麦苗期抗赤霉病的室内鉴定方法

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